【摘 要】
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目的:探讨宫内发育迟缓大鼠在胰腺发育期Sox9的表达,及其对于胰腺细胞形成和胰腺结构的影响。研究方法:通过选取体重230-280g健康雌性、处女Wistar大鼠80只,体重300-320g健康
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目的:探讨宫内发育迟缓大鼠在胰腺发育期Sox9的表达,及其对于胰腺细胞形成和胰腺结构的影响。研究方法:通过选取体重230-280g健康雌性、处女Wistar大鼠80只,体重300-320g健康雄性大鼠,按照雌雄(4:1)大鼠合笼,将受孕鼠随机给予全程低蛋白饲料或正常饲料任意摄取喂养,将其子鼠分为IUGR组和对照组(CON)组,随机选取孕E15.5、E18.5、P1天IUGR和对照组大鼠,剖宫产或自然娩出胎鼠或新生鼠,记录体重小于正常组体重2个标准差确定为E15.5、E18.5、P1天IUGR子鼠造模成功;在解剖显微镜下分离E15.5、E18.5、P1天胚胎胰腺组织;采用HE染色、透射电镜检测胰腺形态及超微结构;采用RT-PCR检测Sox9、Pdx1mRNA水平;Western-blot、免疫组织化学染色检测Sox9蛋白表达水平和位置;免疫荧光双染检测Sox9和Pdx1共表达情况。结果:(1)随着胰腺的发育,腺泡、导管逐渐聚集成典型的内分泌、外分泌结构;超微结构显示,线粒体和酶原颗粒逐渐增大;在发育阶段Sox9主要聚集在胰腺的导管,且随着胰腺发育表达量逐渐降低(P<0.01),同时Sox9与Pdx1共表达的蛋白也逐渐减少。(2)E15.5、E18.5、P1 IUGR组的体重纳入标准分别为0.222g、1.251g、5.17g;与对照组相比,IUGR组胎鼠体重明显降低(P<0.05);E15.5、E18.5、P1天IUGR造模成功率分别为40%、53%、84%;IUGR组中胰腺腺泡、导管、胰岛的数量降低;IUGR组中Sox9与Pdx1的mRNA表达量趋势一致,较对照组表达量降低(P<0.05);IUGR组中表达在胰腺导管中的Sox9蛋白降低(P<0.05),同时Sox9与Pdx1共表达的蛋白也逐渐减少。结论:在胚胎胰腺发育期Sox9高表达,在成熟期低表达,说明Sox9主要调节胰腺祖细胞发育。宫内发育迟缓大鼠胰腺组织内Sox9表达降低,影响胰腺细胞发育,并导致胰腺结构损伤。
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