【摘 要】
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该文一方面从基因工程假单孢杆菌(Pseudomonas putida)发酵微环境入手,研究了培养基组成和培养条件对菌体生长和干扰素生产的影响.另一方面也对干扰素进行PEG修饰、剂型改变
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该文一方面从基因工程假单孢杆菌(Pseudomonas putida)发酵微环境入手,研究了培养基组成和培养条件对菌体生长和干扰素生产的影响.另一方面也对干扰素进行PEG修饰、剂型改变、药物释放控制进行了研究.以模糊理论为基础,提出了生长生产耦合度概念,定量表征生长和生产的同步程度.采用30℃-20℃的两阶段培养,并采用历时一小时缓慢降温实现生长生产阶段转换,干扰素产量提高2倍.确定了两阶段培养模式及其培养条件.通过生长阶段培养,将5升发酵罐中菌体密度提高了2-3倍;通过生产阶段培养,将干扰素含量提高了1-2倍.以平均分子量为5000的单甲氧基聚乙二醇(mPEG)为原料,以酰化试剂法活化mPEG,对干扰素α-2b进行分子修饰.采用模仿生物体液环境的仿生学思路制成稳定的干扰素液体制剂,以羟乙基淀粉-40、柠檬酸缓冲液等成分稳定干扰素,制剂中未使用人血白蛋白、防腐剂成分,无需惰性气体保护.以聚乳酸乙醇酸为材料将干扰素α-2b包裹成微囊,具有规整几何表态,平均粒径为2.337μm,粒径主要分布在0.4μm~60μm之间.制备的微囊载药量为4.16﹪,包封率不小于98.6﹪,体外释药实验证明具有很好的缓释效果.
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