【摘 要】
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目的:1、探究远隔缺血后处理的神经保护作用及对Th1、Th2、Th17、Treg细胞占CD4+T细胞比例的影响。2、探究远隔缺血后处理对各亚群分化相关转录因子表达的影响。方法:1、根据入组及排除标准,筛选自2021年5月至2021年11月就诊于吉林大学第一医院神经内科,且发病时间距开始post-RIC治疗在3天内的急性前循环脑梗死患者共35例,根据患者意愿分为post-RIC组（14例）及常规治疗
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目的:1、探究远隔缺血后处理的神经保护作用及对Th1、Th2、Th17、Treg细胞占CD4+T细胞比例的影响。2、探究远隔缺血后处理对各亚群分化相关转录因子表达的影响。方法:1、根据入组及排除标准,筛选自2021年5月至2021年11月就诊于吉林大学第一医院神经内科,且发病时间距开始post-RIC治疗在3天内的急性前循环脑梗死患者共35例,根据患者意愿分为post-RIC组（14例）及常规治疗组（21例）。同期招募与患者组年龄、性别、高血压、糖尿病病史无差异且无脑梗死及炎症相关疾病的15名志愿者作为非梗死组。常规治疗组给予改善循环、营养神经、抗血小板聚集、稳定斑块及对症治疗。post-RIC组在常规治疗组用药基础上,给予post-RIC治疗,即使用缺血预适应仪对患者双上肢进行加压5分钟/再灌注5分钟,每次进行5个循环,每天治疗两次并连续治疗7天。非梗死组仅针对卒中危险因素进行对症处理。post-RIC组在后处理治疗前及治疗3天、7天后的清晨空腹采取外周静脉血,常规治疗组在相同的时间进行采血,采血时间记为0d、3d、7d,并对患者在治疗前及治疗7天后进行NIHSS评分,非梗死组仅采集一次空腹外周静脉血。记录患者一般临床资料,采用流式细胞分析仪及Flowjo 10软件测定三次采血时Th1、Th2、Th17及Treg细胞占CD4+T细胞比例,用荧光定量PCR法测定三次采血时外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cell,PBMC）中各亚群分化相关转录因子mRNA表达水平,包括T-box转录因子（T-box transcription factors,T-bet）、GATA结合蛋白3（GATA binding protein-3,GATA3）、RAR相关孤儿受体γ（RAR-related orphan receptor、RORγt）、叉头样转录因子p3（forhead transcription p3,Foxp3）。2、分析脑梗死患者治疗前Th1、Th2、Th17及Treg细胞占CD4+T细胞比例及Th1/Th2、Th17/Treg比值与NIHSS评分的相关性,并进一步行简单线性相关分析;比较常规治疗组与非梗死组患者各亚群占CD4+T细胞比例差异。3、比较常规治疗组与post-RIC组NIHSS评分变化程度（ΔNIHSS评分=治疗前NIHSS评分-治疗后NIHSS评分）差异,以及两组在各次采血时Th1、Th2、Th17、Treg细胞占CD4+T细胞比例和Th1/Th2、Th17/Treg比值差异。4、比较常规治疗组与post-RIC组各次采血时各亚群分化相关转录因子（T-bet、GATA3、RORγt、Foxp3）mRNA表达水平差异。结果:1、在脑梗死发病3天内,患者外周血Th2细胞占CD4+T细胞比例与NIHSS评分呈负相关（r=-0.481,P=0.005）,Th1/Th2比值与NIHSS评分呈正相关（r=0.389,P=0.028）,Th1、Th17、Treg细胞占CD4+T细胞比例及Th17/Treg比值与NIHSS评分未见明显相关性。2、在三次采血中,常规治疗组患者Th2细胞占CD4+T细胞比例始终低于非梗死组（P=0.001,P=0.006,P=0.008）,Th1/Th2比值始终高于非梗死组（P=0.008,P=0.03,P=0.049）;在第一次采血时,Treg细胞占CD4+T细胞比例低于非梗死组（P=0.022）,Th17/Treg比值高于非梗死组（P=0.022）;Th1、Th17细胞占CD4+T细胞比例与非梗死组无明显差异。3、post-RIC组患者ΔNIHSS评分高于常规治疗组（P=0.002）。4、post-RIC组患者外周血Th2细胞占CD4+T细胞比例比例在3d、7d时均高于常规治疗组（P=0.001,P=0.041）,Th1/Th2比值均低于常规治疗组（P=0.05,P=0.006）。5、post-RIC组患者PBMC中GATA3 mRNA表达水平在3d、7d时,显著高于常规治疗组（P=0.032,P=0.035）。结论:1、脑梗死患者发病3天内,外周血Th2细胞占CD4+T细胞比例与患者病情严重程度呈负相关,Th1/Th2比值与病情严重程度呈正相关。2、脑梗死急性期患者外周炎症水平向促炎方向倾斜,可见Th2、Treg细胞占CD4+T细胞比例降低,Th1/Th2、Th17/Treg比值升高。3、远隔缺血后处理可能通过提高患者外周血Th2细胞占CD4+T细胞比例、降低Th1/Th2比值来发挥其神经保护作用。4、远隔缺血后处理可能通过促进GATA3 mRNA表达来提高外周血Th2细胞占CD4+T细胞比例,降低Th1/Th2比值。
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