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液氮深低温保存的同种带瓣大动脉作为一种替代材料已广泛应用与心血管外科的临床实践中。它不仅用于主动脉瓣、肺动脉瓣及二尖瓣的置换，同时还是复杂先天性心脏畸形矫治术中带瓣外管道及补片的良好材料。它具有瓣膜口径大、结构自然、血流动力学效应好、不易形成血栓、不需抗凝，细菌不易附着、术后感染性心内膜炎发生率低等特点，尤其是瓣膜组织保持有一定的生物活性，不易发生组织退行性变、老化及钙化，在临床上得到越来越广泛的应用。因此在同种带瓣大动脉的制备过程中如何最大限度地保留其活性成为一项重要课题。本实验欲通过三种不同水浴条件下灭菌及冷冻保存前后内皮细胞葡萄糖代谢率及台盼蓝拒染率差别的观察，探讨水浴条件及冷冻保存对同种带瓣大动脉内皮细胞活性的影响机制，寻找一种灭菌效果好、对同种带瓣大动脉内皮细胞活性影响小的制备方法，以最大限度地保留其活性。 材料与方法 本实验选取修剪完毕的同种带瓣大动脉30只，其中带瓣主动脉15只，带瓣肺动脉15只，随机分成3组，每组10只，灭菌前后均做细菌及霉菌培养。每组均用含头孢西丁(Cefoxtin)240mg/L、林克霉素(Lincomycin)120mg／L、多粘菌素B(Polymycin B)100mg/L、万古霉素(Vancomycin)50mg/L的RPMI1640液水浴灭菌，A组37℃水浴24小时，B组37℃水浴6小时，C组6℃水浴24小时，取出后留取血管内膜标本做葡萄糖代谢率、内皮细胞台盼蓝拒染率测定。取修剪完未灭菌的内膜组织标本作为对照。冷冻保存的同种带瓣大动脉解冻了8只，分别于保存3—15个月取出解冻，比较其保存前后血管内膜标本做葡萄糖代谢率、内皮郑州大学2003年硕士毕业论文同种带瓣大动脉活性影响因素的实验研究细胞台盼蓝拒染率的变化。 结果 ①30只同种带瓣大动脉灭菌前培养结果:A组8例阳性，B组6例阳性，C组6例阳性，阳性率为667%。灭菌后培养结果各组标本无一例阳性，8只解冻的标本培养结果亦均为阴性。②各实验组葡萄糖代谢率均明显低于对照组(A组:35、54土1 .76m酬l·24h、B组:39.44士1.49 mg/dl·24h、C组:38.60士1.27m酬l·24h、对照组:41 .98士1 .76m脚1·24h)。③各实验组内皮细胞台盼蓝拒染率均明显低于对照组(A组:79.7%、B组:87.6%、C组:867%、对照组:93.2%)，p<0.05。④各实验组内葡萄糖代谢率A组(35.54士l.76mg/dl·24h)低于B、C组(39，44士1.49 mg/dl·24h、38.60士1.27 mg/dl·24h)，p<0.01。而B、C组之间无明显差异，P>0.05。⑤各实验组内内皮细胞台盼蓝拒染率A组 (79.7%)低于B、C组(87.6%、86.7%)，P<0.05。而B、C组之间无明显差异，P>0.05。⑥标本冻存后其活性降低，尤其冻存6个月以上的降低明显，其中一例冻存15个月，其葡萄糖代谢率低于16m留di·24h。 结论 1.本实验所用抗生素配方水浴灭菌能达到比较可靠的灭菌效果。 2.抗生素水浴灭菌处理对同种带瓣大动脉组织细胞活性有损伤，经典的37 ℃条件下培养24小时损伤最严重，而37℃条件下培养6小时损伤最轻， 且能达到满意的灭菌效果。 3.液氮深低温保存对同种带瓣大动脉组织细胞活性有影响，随保存时间的 延长活性逐渐降低，尤其是保存9个月以后，活性降低更明显。