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Geminin(Gem)蛋白是McGarry和Kirschner于1998年在非洲爪蟾中发现的一种定位于核内的多功能小分子蛋白。这种蛋白在细胞有丝分裂期能够发生周期特异性降解,在细胞增殖、细胞分化、胚胎发育及肿瘤发生等多方面均发挥重要作用。它参与DNA复制的调节;抑制同一细胞周期中的DNA二次复制从而维持遗传物质的稳定性;推进G2/M期和维持正常胞质分裂等。通过与同源异型盒基因或蛋白Six3及Hox等的相互作用,Geminin在胚胎发育过程中起调节作用,并且表现出在细胞增殖与分化中协调因子的功能。在不同发育阶段,Geminin在不同的区域表达,可作为抑制因子或是诱导因子参与胚胎发育的调节;特别是在神经形成方面。Kroll等在分离对神经发育起活化作用的蛋白质时发现,当非洲爪蟾胚胎中过表达Geminin时,将会导致神经板的扩大。在我们的工作中发现,Geminin功能异常将导致严重的后脑发育缺陷。
后脑是中枢神经系统中唯一在发育过程中出现分节现象的部分。在神经管闭合后,后脑沿前一后轴逐渐被划分成7节,成为菱脑节(rhombomere)。为阐明Geminin在斑马鱼后脑模式形成过程中的作用,我们在Foxd3:GFP和Islet1:GFP转基因鱼中发现Geminin的功能缺失将导致神经冠细胞迁移的异常和三叉神经、面神经的神经纤维投射方向的错误;骨染色实验显示,Geminin的缺失将诱导舌软骨错误的生长方向,以及5对鳃弓的完全消失;3A10抗体显色的实验结果显示,Geminin对第4菱脑节的一对Mauthner神经元的分化及其所发出的两条神经纤维在体轴中线上的交叉至关重要;细胞移植实验的结果则显示,Geminin在后脑模式形成过程中的作用是非自主性。进一步的,通过全胚胎原位杂交(Whole mount in situ hybridization)实验结果的分析,我们发现Geminin是中后脑连接区峡部组织者(isthmic organizer,IsO)中表达的FGF8的一个负调控因子。这些结果显示,Geminin通过调控FGF8的表达,在后脑模式形成的过程中发挥功能,进而调控了后脑的神经投射和神经冠细胞衍生的软骨形成。