【摘 要】
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目的:1、GOLPH3（高尔基磷蛋白3,Golgi phosphoprotein 3）对胶质母细胞瘤U251细胞恶性生物学行为的影响;2、探讨GOLPH3是否通过RAS/MAPK信号通路调控胶质母细胞瘤U251细胞的恶性生物学行为。方法:1、体外培养胶质母细胞瘤U251细胞株,构建三组不同细胞株,其中一组含si-GOLPH3质粒（实验组）,另一组含si-NC质粒（阴性对照组）,第三组不做任何处理为
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目的:1、GOLPH3（高尔基磷蛋白3,Golgi phosphoprotein 3）对胶质母细胞瘤U251细胞恶性生物学行为的影响;2、探讨GOLPH3是否通过RAS/MAPK信号通路调控胶质母细胞瘤U251细胞的恶性生物学行为。方法:1、体外培养胶质母细胞瘤U251细胞株,构建三组不同细胞株,其中一组含si-GOLPH3质粒（实验组）,另一组含si-NC质粒（阴性对照组）,第三组不做任何处理为Control组（空白对照组）;2、使用实时荧光定量PCR法（q RT-PCR实验）检测三组细胞中GOLPH3 m RNA表达量;3、使用MTT实验（四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法）检测三组细胞的增殖情况,使用Transwell实验检测三组细胞的迁移和侵袭情况,使用流式细胞术检测各组细胞的凋亡变化;4、使用Western blot法（蛋白印记法）检测RAS/MAPK信号通路下游蛋白Raf-1在三组细胞中的表达情况。结果:1、q RT-PCR实验结果显示:si-GOLPH3组中GOLPH3m RNA的表达强度要明显低于si-NC组和Control组,差异有统计学意义（P＜0.05）;GOLPH3 m RNA的表达强度在si-NC组和Control组之间差异无统计学意义（P＞0.05）。2、MTT实验结果示:si-GOLPH3组在0h、24h、48h及72h的OD值均低于其余两组,差异在24h、48h及72h有统计学意义（P＜0.05）;而si-NC组在0h、24h、48h及72h的OD值与Control组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。3、Transwell实验（迁移实验）结果显示:si-GOLPH3组、si-NC组和Control组穿膜细胞的OD值之间差异有统计学意义（P＜0.05）;且si-GOLPH3组穿膜细胞的OD值明显低于其余两组,差异具有统计学意义（P＜0.05）;Control组与si-NC组穿膜细胞的OD值差异不明显,无统计学意义（P＞0.05）。4、Transwell实验（侵袭实验）结果显示:si-GOLPH3组、si-NC组和Control组穿透基质胶膜细胞的OD值之间差异存在统计学意义（P＜0.05）;且si-GOLPH3组穿透基质胶膜细胞的OD值显著低于其余两组,差异有统计学意义（P＜0.05）;Control组与si-NC组穿透基质胶膜细胞的OD值差异不明显,无统计学意义（P＞0.05）。5、流式细胞术结果显示:si-GOLPH3组细胞的凋亡率要明显高于si-NC组和Control组,差异有统计学意义（P＜0.05）;两对照组细胞的凋亡率比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。6、Western Blot实验结果显示:si-GOLPH3组中Raf-1蛋白表达水平相较于两对照组明显偏低,差异有统计学意义（P＜0.05）,两对照组中Raf-1蛋白表达水平差异无统计学意义（P＞0.05）。结论:1、GOLPH3表达可促进胶质母细胞瘤U251细胞的增殖、迁移和侵袭,抑制细胞凋亡。2、GOLPH3可能通过RAS/MAPK信号通路影响胶质母细胞瘤U251细胞的恶性生物学行为。
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