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目的:原阿片碱是贵州苗药“消疤草”的主要活性成分之一,具有抗炎、抗肿瘤、肝纤维化等活性作用。鉴于抗纤维化这一特性,本实验拟通过研究原阿片碱对转化生长因子β1诱导的体外人角膜基质成纤维细胞的影响,探讨原阿片碱是否具有抗人角膜基质纤维化的潜能,为“消疤草”开发利用提供科学理论依据。方法:从全飞秒激光小切 口透镜摘除术（Small Incision Lenticule Extraction,SMILE）中获取人角膜基质进行原代提取,细胞培养及浓度为2.5ng/mL TGF-β1纤维化诱导。实验分为对照组、HCF组、低（200 μmol/L）、中（400 μmol/L）、高（800 μmol/L）浓度原阿片碱组。作用24小时后,共聚焦显微镜下观察细胞生长情况,TGF-β1诱导及PTP抑制后的细胞形态;CCK-8法检验细胞增殖抑制情况;流式细胞术检测细胞凋亡率;实时荧光定量逆转录-聚合酶链式反应（Real time-PCR,RT-PCR）测定α-SMA（α-Smoothmuscleactin,α-SMA）、角质蛋白（Keratocan）、基膜聚糖（Lumican）、乙醛脱氢酶（ALDH3）、波形蛋白（Vimentin,VIM）、纤连蛋白（Fibronectin,FN）mRNA的相对表达量;Western Blot检测细胞中α-SMA、FN、基质金属蛋白酶（Matrix Metalloproteinase-2,MMP-2）、基质金属蛋白诱导因子（Extracellular matrix metalloproteinase inducer,EMMPRIN）的蛋白相对表达量。结果:显微镜下可观察到在原代提取进行至第五天时,细胞开始围绕组织爬出,形态多呈多边形;第十天见细胞铺满瓶底,可行细胞传代。TGF-β1诱导24小时后细胞形态可见为长梭形。在共聚焦显微镜下可观察到HCF组α-SMA、Fibronectin表达明显增高,呈强阳性。RT-PCR结果显示与HK组相比,HCF细胞中Keratocan mRNA相对表达量减少,α-SMA、FN、VimmRNA相对表达量增高,差异具有显著性（P＜0.05或P＜0.01）。Western blot结果表明在诱导后,HCF细胞中的α-SMA、FN、MMP-2及EMMPRIN的蛋白相对表达量均有不同程度升高,差异具有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）。经过PTP（400μmol/L）抑制后,共聚焦显微镜可观察到α-SMA、Fibronectin表达呈弱阳性或阴性。利用CCK-8法检测出50、100、150、200、250、400、500、800、1000 μmol/LPTP作用HCF细胞24小时后的增殖抑制率分别为5%、10%、22%、29%、38%、48%、63%、73%、98%,结果显示抑制作用呈浓度依赖性,无时间依赖性（P＜0.05或P＜0.01）。流式细胞术结果提示低、中、高浓度PTP均在不同程度上增加HCF细胞的凋亡率（P＜0.05或P＜0.01）。与TGF-β1组比较,低、中、高浓度PTP组细胞中α-SMA、VIM、FN的mRNA和蛋白相对表达显著降低（P＜0.05或P＜0.01）,低、中浓度PTP有刺激Keratocan mRNA表达（P＜0.05或P＜0.01）,高浓度PTP作用不明显（P＞0.05）,低、中、高浓度对Lumican和ALDH3的表达无明显作用。Western blot结果显示低、中、高浓度PTP组细胞中α-SMA、Fibronectin、MMP-2及EMMPRIN蛋白表达量明显低于TGF-β1组,差异具有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）。结论:①TGF-β1可促进人角膜基质成纤维细胞的转化,并利用2.5ng/mL可成功诱导人角膜基质纤维化体外模型的建立。②原阿片碱可抑制TGF-β1诱导的角膜基质成纤维细胞的增殖并促进其凋亡。(③原阿片碱可通过抑制EMMPRIN-MMPs的表达,缓解细胞外基质的沉积重塑,从而影响纤维化过程。④原阿片碱可抑制TGF-β1促进的人角膜基质成纤维细胞转化,从而影响人角膜基质纤维化的发展过程。