【摘 要】
：
研究背景和目的:免疫性血小板减少症（Immune thrombocytopenia,ITP）是一种获得性的自身免疫性疾病,主要以皮肤粘膜不同程度的出血、外周血中血小板减少等为特征。ITP发病机制复杂,现在普遍认为体液免疫紊乱、细胞免疫失衡、巨核细胞成熟障碍等机制共同参与该病的发生发展。有研究证实,在Ets-1缺陷小鼠体内,Th17细胞数量明显增加,而Treg细胞出现功能性发育障碍[1-2]。在IL
【基金项目】
：
2017年国家自然科学基金（项目号:81770115）《E3泛素连接酶HUWE1在免疫性血小板减少性紫癜Treg/Th17免疫失衡中的作用和机制研究》；
论文部分内容阅读
研究背景和目的:免疫性血小板减少症（Immune thrombocytopenia,ITP）是一种获得性的自身免疫性疾病,主要以皮肤粘膜不同程度的出血、外周血中血小板减少等为特征。ITP发病机制复杂,现在普遍认为体液免疫紊乱、细胞免疫失衡、巨核细胞成熟障碍等机制共同参与该病的发生发展。有研究证实,在Ets-1缺陷小鼠体内,Th17细胞数量明显增加,而Treg细胞出现功能性发育障碍[1-2]。在IL-6和TGF-β刺激下,Ets-1促进Th17细胞分泌更多的IL-17;在Treg细胞中,Ets-1通过调节Foxp3的稳定表达影响其发育和功能[3]。因此认为Ets-1是调节Th17/Treg细胞间平衡的关键因子,恢复Ets-1表达和活性成为自身免疫性疾病治疗的新研究热点。我们前期的研究证实,ITP患者的外周血CD4+T细胞中E3泛素连接酶HUWE1高表达,并与血小板计数呈负相关;HUWE1敲除后Treg细胞比例增加并促进Treg细胞对效应细胞的增殖抑制作用,即ITP患者外周血CD4+T细胞中HUWE1的mRNA水平与Treg所占比例呈负相关。所以本课题旨在通过多种分子生物学研究方法和基因修饰小鼠,从细胞水平和模型动物水平探究E3泛素连接酶HUWE1如何通过Ets-1影响Th17/Treg细胞比例,导致ITP疾病的发生发展。研究方法:采用Western Blot（WB）检测ITP患者外周血CD4+T细胞中Ets-1的水平;Co-immunoprecipitation（Co-IP）、WB分别检测MEK-ERK激活状态、Ets-1 磷酸化状态对HUWE1与Ets-1结合的影响,探讨HUWE1与Ets-1的相互作用机制;通过Co-IP、WB检测转染后Jurkat T细胞的HUWE1、Ets-1表达情况;WB检测HUWE1、Ets-1、MEK1的表达情况,探讨HUWE1对Ets-1蛋白泛素化降解的影响。用Lenti-GFP、Lenti-HUWE1和/或Lenti-Ets-1 转染na?veCD4+ T细胞,采用 qRT-PCR、流式检测Foxp3表达量和Treg细胞的比例;流式检测与Treg共培养后效应T细胞增值情况。构建ITP小鼠模型,腹腔注射HUWE1抑制剂BI8622,采用血小板计数方法检测血小板数量的变化;流式检测小鼠脾脏中Treg细胞百分比;WB检测Ets-1和p-Ets-1的表达情况;Co-IP、IB检测ITP小鼠脾脏中na?veCD4+T细胞内HUWE1与Ets-1之间的相互作用。结果:ITP患者外周血CD4+T细胞HUWE1的表达水平与Ets-1蛋白表达水平呈负相关;HUWE1过表达会降低Ets-1蛋白的表达,蛋白酶体抑制剂可解除HUWE1的抑制作用;CD4+T细胞中HUWE1过表达抑制Treg细胞分化,但其对Th17细胞的分化无影响;ITP小鼠模型证实HUWE1抑制剂对ITP具有缓解作用。结论:HUWE1通过促进Ets-1泛素化,抑制Treg细胞分化,参与ITP的发病。
其他文献
以隋唐时期的女子襦裙服饰为主要研究出发点，通过文献研究法、归纳对比法、图像研究等方法，对该时期女子襦裙服饰款式、色彩、纹样艺术特征进行归纳，从而针对性分析其艺术特征形成的原因。研究表明：（1）款式艺术特征——襦裙服装及配饰的款式配置完整度较高；襦裙服饰领口形状为主要的款式结构变化。成因——宗教信仰以及女性地位提高的内在因素影响；丝绸之路背景的外在因素影响。（2）色彩艺术特征——淡雅稳重冷色调，实现
在2014年之前,我国对债券市场一直是给予一定的扶持。当遇到因债券违约而出现兑付危机时,作为“隐性担保”兜底主体的政府会进行缓冲调节,进而实现大众口中的刚性兑付。而2014年的“11超日债”打破惯例,其不能正常得到偿付。至此政府的“刚性兑付”也不再是安心之丸。违约债券的难以控制导致许多公司因此破产,进入破产重整程序。违约债券既可以是破产重整的导火索,又或许是破产重整成功的助推器。通过实践的积累,破
随着时代的演进,未成年人的地位逐渐受到重视,其具有独立人格已成为当今世界共识,目前许多国家逐渐承认未成年人有相应的医疗决定能力,并尊重其医疗自主权。而我国并未规定未成年人有能力决定与其年龄、智力相适应的医疗行为,2010年卫生部《病历书写基本规范》第10条规定患者不具备完全民事行为能力时,知情同意书应由其法定代理人签字。该条直接剥夺了非完全民事行为能力的未成年人的医疗决定能力,实务上医院为避免纠纷
随着网络游戏的诞生与发展,游戏规则抄袭就是网络游戏著作权案件中始终绕不过去的主题。在现实生活中,抄袭具有特定呈现方式的规则,在此基础上更换游戏的音乐、画面等美学元素以形成新的网络游戏产品的“换皮”行为屡见不鲜。但目前理论法学界却受限于规则属于思想的固有观点,网络游戏规则的法律保护模式也并不明确,传统的作品类型定性难以涵盖具体规则的内容,对网络游戏具体规则的保护力度不足,在司法实践中对网络游戏要素缺
我国抵押物转让规则屡经变迁,立法模式在限制与自由之间反复徘徊,可谓“一波三折”。《中华人民共和国民法典》（以下简称《民法典》）明确抵押物可以自由转让,这一立法转向有利于充分发挥物的效用,符合实践需求亦顺应立法潮流,具有显著的积极意义。本文通过历史解释、体系解释、价值分析等方法在梳理我国抵押物转让规则立法沿革的基础上,对禁止转让说、限制转让说、自由转让说作出反思和评析;在论述抵押物转让中各方主体利益
目的:回顾性分析儿童急性淋巴细胞白血病（ALL）分子生物学特点,初步探索全转录组测序技术（RNA-seq）在儿童ALL个体化、精准化治疗中的应用价值。方法:收集并回顾性分析2020年7月至2021年10月苏州大学附属儿童医院血液肿瘤中心收治的初诊ALL儿童的临床资料。所有患儿均经骨髓细胞形态、流式免疫分型、RT-PCR、FISH、染色体核型分析及RNA-seq检测确诊。结果:216例初诊ALL患儿
随着网络数字技术的发展,越来越多的新型视听内容及节目不断涌现,现行《著作权法实施条例》中关于“电影作品和以类似摄制电影的方法创作的作品”定义的缺陷逐渐显现,同时围绕着相关视听内容的画面到底构成“电影和类电作品”还是“录像制品”,学界及业界存在巨大的争议。2020年我国《著作权法》完成了第三次修订,引进了“视听作品”来替代原先的“电影和以类似摄制电影的方法创作的作品”,这为新型视听智力成果的认定打开
第一部分心肌做功在新生儿窒息心肌损伤早期识别中的研究目的应用心肌做功评估窒息新生儿出生24h内的心脏功能,探究其在新生儿窒息早期识别心肌损伤中的作用。方法纳入53例出生24h内入住我院新生儿科并诊断为新生儿窒息的患儿作为研究对象。选取性别、胎龄、出生体重相匹配的一般情况良好的53例出生24h内的新生儿作为对照组,共分为早产儿轻度窒息组25例,早产儿重度窒息组11例,足月儿轻度窒息组15例,足月儿重
研究背景与目的:异基因造血干细胞移植术（allo-HSCT）是目前儿童多种血液系统疾病的有效治愈手段。然而急、慢性移植物抗宿主病（GVHD）、巨细胞病毒（CMV）和EB病毒（EBV）感染等移植后并发症,极大影响着患者的生存质量及长期生存率。树突状细胞（DC）是一种重要的免疫细胞,具有调控免疫应答和诱导免疫耐受的双重作用,在GVHD和病毒感染的病理生理过程中发挥着重要作用。每份供体移植物中含有数量不
第一部分:血清外泌体源miR-21-5p在川崎病急性期亚急性期的表达目的:通过前期实验,我们筛选出了4种在川崎病急性期患儿与健康儿童之间差异表达的血清外泌体源miRNAs。在此基础上,我们将进一步研究川崎病血清外泌体中miRNAs在川崎病不同时期的表达,并探讨其是否与川崎病炎性损伤有关。方法收集2021年03月至2021年11月之间,在苏州大学附属儿童医院心血管内科住院治疗的川崎病患儿急性期（1-