海蜇糖蛋白对细胞因子mRNA表达的影响研究

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海蜇(Rhopilema esculehtum)是一种经济价值、营养价值和药用价值均极高的医食同源性大型水母。糖蛋白是一种普遍存在于生物体内的糖与蛋白质的复合物,具有细胞间识别调控作用,还具有多种生物活性,如抗肿瘤活性、调节免疫活性等。细胞因子是一种可在细胞间传递信息的小分子糖蛋白或蛋白,是机体免疫系统重要的的组成部分。本课题着重对海蜇糖蛋白对细胞因子mRNA表达量的影响进行研究,对海蜇糖蛋白的免疫活性进行分子水平的分析,旨在为我国海蜇资源的开发利用提供一定的理论依据,为新型免疫类药物及保健食品的开发提供一定的理论参考。研究内容及结果如下:1.体外实验:处死小鼠,无菌取脾脏,分离得到淋巴细胞,分5组(正常对照组、模型对照组、海蜇糖蛋白高、中、低剂量组),给药,置于细胞培养箱中培养。提取各组细胞总RNA,逆转录为cDNA,采用荧光定量PCR技术检测各组Th1,Th2和Th17类细胞因子mRNA表达量,实验数据采用相对定量法进行处理。实验结果为,海蜇糖蛋白可显著提高Th1类细胞因子mRNA表达量,且高剂量组表现为与正常对照组无显著差异;海蜇糖蛋白可显著降低Th2类和Th17类细胞因子mRNA表达量,且中剂量组和高剂量组均与正常对照组无显著差异。2.体内实验:小鼠随机分6组,即空白对照组、阳性对照组、模型对照组、海蜇糖蛋白高、中、低剂量组。建造模型,灌胃给药21d后,处死小鼠,无菌取脾脏,分离得到淋巴细胞,提取细胞总RNA,逆转录为cDNA,检测各组Th1,Th17和Th2类细胞因子mRNA表达量,实验数据采用相对定量法进行处理。实验结果为,海蜇糖蛋白可显著上调Th1类细胞因子mRNA表达量,且糖蛋白高剂量组表现为与空白对照组无显著性差异;海蜇糖蛋白可显著下调Th2类和Th17类细胞因子mRNA表达量,且糖蛋白高剂量组与空白对照组无显著差异。3.体内外实验结果显示,海蜇糖蛋白通过细胞培养给药和体内灌胃给药,对细胞因子mRNA表达量的影响趋势是一致的。推测海蜇糖蛋白可能是通过促进Th1类细胞因子的分泌,抑制Th2类和Th17类细胞因子的分化,从而达到免疫调节功能。
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