酶法合成低聚半乳糖及其在乳粉中的应用

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本论文对米曲霉中提取的游离β-半乳糖苷酶作用于高浓度的脱盐乳清溶液合成低聚半乳糖的影响因素,合成低聚半乳糖的最佳反应条件,低聚半乳糖的检测方法,低聚半乳糖在奶粉中的应用,低聚半乳糖对双歧杆菌的促进作用和合成低聚半乳糖过程中的动力学模型进行了研究。 首先通过单因素实验确定各因素对低聚半乳糖合成的影响,并通过正交实验,确定了制备低聚半乳糖的最佳反应条件为:温度50℃,反应时间1h,乳糖浓度30%(w/v),酶浓度0.12%(w/v),pH 4.5。然后,对低聚半乳糖的分离、检测方法进行了研究。实验证明,低聚半乳糖可以利用快速、简便的薄层层析法得到分离和检测。最佳的分离条件为:薄板为用0.1mol/L磷酸氢二钠溶液制备的硅胶板,活化温度为110℃,时间为1小时,展开剂为:正丁醇:丙酮:水=4∶5∶1。最终,通过高效液相色谱仪准确地测量反应物中低聚糖的含量为23.4%。在合成低聚半乳糖的最佳条件下,利用乳清粉生产低聚半乳糖后,以鲜奶(w):含有低聚半乳糖的乳清粉(w)=1∶2比例混合得到功能性奶粉,其成分为:蛋白质21.7%、脂肪19.7%、总糖58.6%、低聚半乳糖7.5%。与此同时,论文还对含有低聚半乳糖的乳清粉和含有低聚半乳糖的奶粉对双歧杆菌的作用进行了评价,确定了低聚半乳糖对双歧杆菌起增殖作用的有效加入量,当低聚半乳糖加入量1%以上就有明显的促进作用。通过跟其他奶粉和低聚异麦芽糖比较得到,低聚半乳糖和低聚异麦芽糖对双歧杆菌的促进作用是相同的,而本论文所制备的奶粉对双歧杆菌的促进作用明显高于市售的功能性奶粉和脱脂奶粉。 本论文进一步对采用游离β-半乳糖苷酶合成低聚半乳糖的最佳反应条件下的动力学过程进行了初步的研究。实验数据通过Matlab统计软件进行处理,得到了合成低聚半乳糖酶促反应过程的乳糖消耗和低聚半乳糖形成的动力学反应模型并确定了动力学模型参数。
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