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目的： 原代培养SD大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞，观察和厚朴酚对TF-α诱导SD大鼠血管平滑肌细胞迁移的影响以及和厚朴酚对TNF-α诱导SD大鼠血管平滑肌细胞MMP-2/9mRNA水平及蛋白水平表达的变化，证明和厚朴酚可以抑制TNF-α诱导的大鼠主动脉血管平滑肌细胞迁移及MMP-2/9表达。 观察和厚朴酚对TNF-α诱导的大鼠主动脉血管平滑肌细胞的ERK磷酸化水平、NF-κB激活及IκBα的降解的影响，以及和厚朴酚对TNF-α诱导的大鼠主动脉血管平滑肌细胞的NF-κB结合活性的影响，并通过体外实验应用NF-κB抑制剂BAY11-7082及p-ERK抑制剂U0126，研究和厚朴酚对TNF-α诱导的大鼠主动脉血管平滑肌细胞迁移及MMP-2/9表达影响的作用机制。 证实和厚朴酚可能通过ERK/NF-κB途径影响TNF-α诱导的大鼠主动脉血管平滑肌细胞迁移及MMP-2/9表达。以探讨和厚朴酚对动脉粥样硬化发生、发展及支架后再狭窄的影响。 方法： 采用组织块贴壁法原代培养SD大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞，免疫荧光方法鉴定原代培养细胞为大鼠血管平滑肌细胞。 MTT法检测和厚朴酚对血管平滑肌细胞活力的影响，根据MTT结果选择0、2.5、5和10uM和厚朴酚用于后续试验。 将正常细胞和不同浓度的和厚朴酚预处理的血管平滑肌细胞，按照细胞分组加入10ng/ml的TNF-α，Transwell方法检测TNF-α诱导的原代培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞迁移及不同浓度和厚朴酚对TNF-α诱导的大鼠主动脉血管平滑肌细胞迁移的影响，显微镜下选择不同视野计数迁移细胞个数并拍照。Real-time PCR方法检测不同浓度Honokiol对TNF-α诱导的大鼠主动脉血管平滑肌细胞MMP-2/9mRNA水平表达的影响，Western blot方法检测不同浓度Honokiol对TNF-α诱导的大鼠主动脉血管平滑肌细胞MMP-2/9蛋白水平表达的影响。 用10ng/ml的TNF-α处理血管平滑肌细胞，于不同作用时间点采用Westernblot方法分别检测各组细胞ERK磷酸化水平、NF-κB激活及IκBα的降解，再以10uMHonokiol预处理血管平滑肌细胞后，继续用10ng/ml的TNF-α处理细胞，于不同作用时间点采用Western blot方法分别检测Honokiol对TNF-α诱导的大鼠主动脉血管平滑肌细胞的ERK磷酸化水平、NF-κB激活及IκBα的降解，同时EMSA方法检测核蛋白NF-κB的结合活性。观察和厚朴酚对TNF-α诱导的大鼠主动脉血管平滑肌细胞的ERK磷酸化水平、NF-κB激活及IκBα的降解的影响，以及和厚朴酚对TNF-α诱导的大鼠主动脉血管平滑肌细胞的NF-κB结合活性的影响。研究和厚朴酚对TNF-α诱导的大鼠主动脉血管平滑肌细胞迁移及MMP-2/9表达影响可能的作用机制。 通过体外实验应用 NF-κB抑制剂BAY11-7082及p-ERK抑制剂U0126预处理血管平滑肌细胞后，继续用10ng/ml的TNF-α、10uMHonokiol处理细胞，于不同作用时间点采用Western blot方法分别检测各组细胞的ERK磷酸化水平、NF-κB激活及IκBα的降解的变化，Transwell检测NF-κB抑制剂BAY11-7082、p-ERK抑制剂U0126对和厚朴酚影响TNF-α诱导大鼠主动脉血管平滑肌细胞迁移的阻断作用，Western blot检测NF-κB抑制剂BAY11-7082、p-ERK抑制剂U0126对Honokiol影响TNF-α诱导的大鼠主动脉血管平滑肌细胞MMP-2/9蛋白水平表达的阻断作用。进一步探讨和厚朴酚影响TNF-α诱导大鼠主动脉血管平滑肌细胞迁移及MMP-2/9表达的作用机制。证实和厚朴酚可能通过ERK/NF-κB途径影响TNF-α诱导的大鼠主动脉血管平滑肌细胞迁移及MMP-2/9表达。 实验结果用均数±标准差表示，采用SPSS13.0软件分析数据，两组间均数采用t检验，多组间比较采用方差分析进行，以P＜0.05为差异有统计学意义。 结果： 1、和厚朴酚能够剂量依赖性地抑制TNF-α诱导的大鼠血管平滑肌细胞迁移。 2、和厚朴酚能够剂量依赖性地抑制TNF-α诱导的大鼠血管平滑肌细胞MMP-2/9的表达。 3、和厚朴酚能够剂量依赖性地抑制TNF-α诱导的大鼠主动脉血管平滑肌细胞的NF-κB激活及IκBα的降解，和厚朴酚可以剂量依赖性地抑制TNF-α诱导的大鼠主动脉血管平滑肌细胞的NF-κB活性。 4、和厚朴酚能够剂量依赖性地抑制TNF-α诱导的大鼠主动脉血管平滑肌细胞的ERK磷酸化水平。 5、NF-κB抑制剂BAY11-7082及p-ERK抑制剂U0126可以剂量依赖性地阻断和厚朴酚对TNF-α诱导的大鼠血管平滑肌细胞的NF-κB激活及IκBα的降解。 6、NF-κB抑制剂BAY11-7082及p-ERK抑制剂U0126可以剂量依赖性地阻断和厚朴酚对TNF-α诱导的大鼠血管平滑肌细胞MMP2/9表达的抑制作用。 7、NF-κB抑制剂BAY11-7082及p-ERK抑制剂U0126可以剂量依赖性地阻断和厚朴酚对TNF-α诱导的大鼠血管平滑肌细胞迁移的抑制作用。 结论： 1、和厚朴酚可以剂量依赖性地抑制TNF-α引起的大鼠血管平滑肌细胞迁移及MMP2/9的表达。 2、和厚朴酚可能通过ERK/NF-κB/MMPs途径抑制TNF-α诱导的血管平滑肌细胞迁移。