论文部分内容阅读
在养羊生产中,通常采用外科阉割手术进行去势,以防止羊肉中的“膻味”,避免性早熟对生长和育肥所带来的不利影响以便于饲养和管理。然而,传统外科阉割去势可引起动物高度应激,外科伤口容易感染甚至造成动物死亡,影响动物生产效率,不能满足动物福利要求等诸多不足。目前的研究表明GnRH (Gonadotropin releasing hormone, GnRH)主动免疫能取得类似于外科阉割去势的效果,并且能克服外科阉割去势的不足,不失为取代传统外科阉割的好方法。藏绵羊是青藏高原的主要畜种之一,主要分布地区包括羌塘高原、阿里东西部和藏南高原等藏西北、藏东南干旱、半干旱地区,具耐寒、耐旱、耐缺氧等特点,饲养藏绵羊是当地牧民收入的主要来源。在本课题组已开展GnRH主动免疫对雄性藏绵羊生殖性能影响的基础上,本试验将进一步探究GnRH主动免疫对雄性藏绵羊免疫功能的影响,为免疫去势这一新方法将来在养羊实践中的应用提供更坚实的理论基础。试验选取24周龄、体重为17-19Kg的雄性藏绵羊30只,随机分为三组,每组10只。其中一组不做任何处理,为空白对照组；一组在试验开始前一周进行外科手术去势,为手术去势组；剩余一组于25周龄时颈部皮下注射2mL GnRH并列体二聚物与卵清蛋白连接复合物(TDK-OVA)的Specol乳化剂(含TDK 100 μg),8周后加强免疫,注射剂量及方法同初次免疫,为免疫去势组。初免当天记为0wpv。初免当天及以后每4周颈静脉采集血样,直至屠宰。加强免疫后8周(即16 wpv),屠宰所有试验绵羊,采集睾丸及脾脏组织,用荧光定量PCR分析脾脏组织CD4、CD8、CD19淋巴细胞的mRNA表达量及脾脏雌激素α受体(ER-α)、雌激素β受体(ER-β)和雄激素受体(AR)mRNA表达量,用酶联免疫法(ELISA)测定整个试验期间血清中GnRH抗体滴度、睾酮含量及屠宰当天血清中免疫因子IL-2、IL-4、IL-6、TNF-α、IFN-γ浓度。初免后机体血清中产生GnRH抗体,加免后4周达到最高峰(55.62%),以后保持在较高水平,直至屠宰(48.85%)；与空白对照组相比,屠宰时免疫去势组睾丸萎缩,其重量和体积均下降到对照组睾丸的80%(P<0.05)；GnRH主动免疫后绵羊血清T含量下降,从4 wpv到屠宰(16 wpv)均显著低于空白对照组(P<0.05)；屠宰时,免疫去势和手术去势显著提高羊血清IL-2、IL-4、IL-6、TNF-α浓度(P<0.05),而对血清IFN-7浓度无影响(P>0.05),但免疫去势组绵羊血清中IL-4和IL-6浓度显著低于手术去势组(P<0.05)；相比于空白对照组,免疫去势和手术去势均显著上调了绵羊脾脏CD4、CD8、CD19、ER-β mRNA表达量(P<0.05),显著下调AR mRNA表达量(P<0.05),而不影响ER-a基因mRNA表达(P>0.05)；上述基因在免疫去势组和手术去势组间无显著差异(P>0.05)。上述研究结果表明GnRH主动免疫：1)能有效抑制睾丸的发育,降低血清睾酮浓度；2)显著提高血清中IL-2、IL-4、IL-6、TNF-α浓度；3)显著上调脾脏CD4、CD8、CD19 mRNA和ER-β mRNA的表达水平及显著降低脾脏AR mRNA的表达量。综上所述,GnRH主动免疫能提高藏绵羊的免疫功能。