鸡球虫单卵囊分离技术的构建及YL地理株的致病性与抗药性研究

来源 :西北农林科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hehong405
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鸡球虫种类多、分布广、危害大,临床上往往呈混合感染,其中致病性最强的是柔嫩艾美耳球虫和毒害艾美耳球虫。为了研究方便,需寻求一种有效的球虫分离技术。为此,采用了琼脂板法构建了一种鸡艾美耳球虫单卵囊分离技术。并应用该技术成功分离出了两种鸡艾美耳球虫地理株,即柔嫩艾美耳球虫杨凌纯种株(YLt)和毒害艾美耳球虫杨凌纯种株(YLn)。同时,分别研究了这两种地理株的致病性与抗药性。结果表明,该方法成功率高(可达40%),方法精确,操作简便,适合普通实验室进行分离,为进行鉴别艾美耳球虫的种类和对进一步研究鸡艾美耳球虫的致病性与抗药性等具有极其重要的意义。YLt卵囊为宽卵圆形,卵囊壁光滑、褐色,无卵膜孔,有极粒,无内、外残体。孢子囊呈长卵圆形,有斯氏体。卵囊平均大小为(20.6±3.29)μm×(17.5±2.47)μm,形状指数为1.17±0.05。孢子化时间为28h。潜隐期(最短)为118h。YLn的卵囊呈椭圆形或圆球形,卵囊壁厚、粗糙、深褐色或黄绿色,无卵膜孔,有极粒,无内、外残体。孢子囊呈卵圆形,有斯氏体。卵囊平均大小为(19.0±1.44)μm×(16.4±2.49)μm,形状指数为1.16±0.06。孢子化时间为24h。潜隐期(最短)为138h。YLt和YLn均有很强的致病性:14日龄雏鸡分别经口接种1×10~5个YLt和YLn的孢子化卵囊,其感染组相对增重率比对照组分别降低了33.5%和36.4%,病变记分分别达到了3.5分和3.2分,且死亡率分别高达60.0%和64.3%。采用相对卵囊产量(ROP)、病变记分减少率(RLS)、最适抗球虫活性百分数(POAA)和抗球虫指数(ACI)等4项指标对抗药性的结果进行综合判定。4项指标均为阴性判为无抗药性(敏感),有1项指标为阳性判为轻度抗药,有2项指标为阳性判为中度抗药,有3项及以上指标为阳性者则判为完全抗药。结果表明,YLt和YLn对不同药物的抗药性测定结果基本一致,如对红宝球绝(Diclazuril)都具有完全抗药性,对克球皇(Maduramicin)具有轻度抗药性,而对克球粉(Clopidol)和氯苯胍(Robenidine)则无抗药性。YLt和YLn对克球皇、红宝球绝、三九球痢灵(Zoalene)等药物均产生轻度抗药或完全抗药,故用这些药物防治杨凌区鸡艾美耳球虫病效果不佳。而YLt和YLn对克球粉和氯苯胍有高度的敏感性,氯苯胍的增重效果更优于克球粉,故在杨凌防治鸡艾美耳球虫病的临床应用中可推荐为首选药。
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