【摘 要】
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目的:通过体内、体外实验,探讨Krüppel样因子4（Krüppel-like factor 4,KLF4）在慢性肝损伤中的表达特点及其对肝细胞凋亡的影响及机制。方法:（1）通过免疫组化法检测35例慢性乙型肝炎（chronic hepatitis B,CHB）患者肝组织中KLF4表达情况,并以10例肝外伤患者的肝组织作为对照,分析KLF4在慢性肝损伤中的表达特点。（2）通过四氯化碳（carbon
【基金项目】
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遵义市科技局科学技术基金项目（遵市科合社字（2018）83）,转录因子KLF4调控巨噬细胞极化与CHB患者肝纤维化的关系研究； 国家自然科学资金项目（81560110）； 贵州省科技厅科技支撑计划项目（黔科合支撑[2019]2803号）； 贵州省科学技术基金项目（黔科合平台人才[2017]5733
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目的:通过体内、体外实验,探讨Krüppel样因子4（Krüppel-like factor 4,KLF4）在慢性肝损伤中的表达特点及其对肝细胞凋亡的影响及机制。方法:（1）通过免疫组化法检测35例慢性乙型肝炎（chronic hepatitis B,CHB）患者肝组织中KLF4表达情况,并以10例肝外伤患者的肝组织作为对照,分析KLF4在慢性肝损伤中的表达特点。（2）通过四氯化碳（carbon tetrachloride,CCl4）分别持续4、8周,诱导小鼠肝损伤,建立慢性肝损伤小鼠模型,探讨在慢性肝损伤中肝内KLF4表达特点及其与氧化应激、细胞凋亡的关系。（3）通过（hydrogen peroxide,H2O2）诱导L02细胞（人正常肝细胞株）氧化损伤,探讨氧化应激对肝细胞KLF4表达和肝细胞凋亡的影响。（4）通过RELA基因特异的短发夹RNA（short hairpin RNA,sh RNA）敲减RELA（核因子-κB的重要亚基）表达,探讨氧化应激调控肝细胞KLF4表达的机制。（5）通过KLF4基因特异的sh RNA预干预H2O2诱导的L02细胞,探讨KLF4对肝细胞氧化应激及细胞凋亡的调控作用及机制。结果:（1）与对照组相比,CHB患者肝组织中KLF4表达水平显著增加,以肝细胞核阳性染色最为显著（P＜0.01）。（2）与对照组相比,CCl4诱导的慢性肝损伤小鼠肝组织中发生明显的氧化应激及肝细胞细胞凋亡,同时伴有KLF4表达增加（P＜0.01）;上调的KLF4定位与乙型肝炎患者的相似,显著升高于肝细胞核内。（3）在体外实验,与对照组相比,过氧化氢诱导的L02细胞KLF4、解耦联蛋白2（uncoupling protein 2,UCP2）表达及细胞凋亡增加（P＜0.05）。（4）与对照组相比,RELA敲减后KLF4、UCP2表达减少,氧化应激及细胞凋亡增加（P＜0.05）。（5）与对照组比较,KLF4敲减后UCP2表达减少,氧化应激及细胞凋亡增加（P＜0.05）。结论:在慢性肝损伤中肝细胞氧化应激通过激活核因子-κB信号上调肝细胞内KLF4表达;上调的KLF4通过提高UCP2表达水平,反馈抑制氧化应激,减轻肝细胞凋亡及肝损伤。
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