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白血病抑制因子(Leukemia inhibitory factor，LIF)是一种多功能细胞因子，不仅具有抑制鼠骨髓白血病细胞系M1细胞增殖的功能，而且对多种细胞的增殖、分化、存活以及胚胎发育都具有重要的作用。本研究拟运用多种生物技术方法，制备重组人源白血病抑制因子(Human leukemia inhibitory factor，hLIF)及其单克隆抗体，为将来hLIF的进一步研究和应用提供基础。
1.为制备具有生物学活性的重组hLIF，本研究首先通过生物信息学分析，设计了利于高效重组表达的hLIF基因编码序列，并采用人工合成方法获得了优化的hLIF基因片段，并以具有可溶性融合伙伴编码基因的质粒pET32a为载体，构建了表达载体pET32a-hLIF，转化大肠杆菌BL21/DE3，IPTG诱导可溶性表达，经超声破碎提取、硫酸铵分级沉淀、镍亲和柱层析、Source30Q阴离子交换柱层析、重组肠激酶消化及镍亲和柱层析精制等蛋白质操作步骤，获得了重组hLIF。并且经过进一步的表达载体DNA序列测定、SDS-PAGE检测、Western-blot鉴定及M1细胞抑制实验，表明本研究已成功构建了能够高效可溶性表达hLIF的重组工程菌BL21/pET32a-hLIF，并制得了满足实验要求的具有与天然hLIF相当的生物学活性的重组hLIF。
2.为获得针对hLIF的单克隆抗体，本研究采用传统的杂交瘤技术，以hLIF为免疫原，经过基础免疫、细胞融合、HAT筛选、ELISA筛选、杂交瘤细胞单克隆化培养、ELISA复筛等一些列技术操作，获得了11株能够分泌表达与hLIF具有特异性免疫反应的杂交瘤细胞能株，通过腹水接种化扩大培养，并经过蛋白A亲和柱层析法，值得了11株单克隆抗体。并对上述单克隆抗体的纯度、浓度、效价、亲和力、特异性、亚类和型别等生物学性质进行了进一步的研究，为将来的进一步应用奠定了基础。