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对模式植物拟南芥的研究表明,CONSTANS(CO)基因在植物开花的光周期途径中起中心调控作用。大豆与拟南芥不同,是一种严格的短日照植物,对其开花的分子机理并不清楚,关于大豆的CONSTANS及CONSTANS-LIKE蛋白的序列、结构功能目前尚无文献报导。根据大豆基因组序列和拟南芥CO基因家族序列比对结果,我们从大豆垦农18中分离得到了13个CONSTANS-LIKE(Gm COLs)基因。根据保守的B-box数量和长度,大豆CO家族基因也可以分成三类,即groupⅠ(2个B-box)、groupⅡ(1个B-box)、groupⅢ(1个B-box和1个保守性较低的锌指结构)。在本实验中,我以GmCOL2作为主要研究对象。qPCR结果显示,GmCOL2 mRNA也表现出明显的节律性表达,但表达模式与拟南芥的明显不同,其表达高峰出现在光照开始前后,而拟南芥COmRNA的表达高峰出现在黑暗开始前;GmCOL2在根部几乎不表达,但在叶片中表达量很高;从大豆的整个生长时期来看,GmCOL2的表达量在第三复叶期有表达高峰。在GFP:GmCOL2转化的拟南芥幼苗中观察到核定位GFP荧光,表明GmCOL2蛋白的定位与拟南芥CO蛋白相同,都是核定位蛋白,可能发挥转录因子的功能。GmCOL2转化拟南芥晚花突变体co-2植株在长日条件下开花时间较突变体提前6天,但转化的野生型植株没有明显的表型。结果表明,大豆GmCOL2至少能部分恢复拟南芥CO的功能,但又有自身的特殊性。