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目的:优化酸枣仁皂苷部位提取分离方法;初步探讨酸枣仁生物碱和皂苷配伍指纹图谱和血清指纹图谱。通过建立不可预见慢性温和应激失眠抑郁小鼠模型,考察酸枣仁中生物碱、皂苷部位和两者配伍后对失眠抑郁模型小鼠行为学、脑内单胺类神经递质的影响和抗氧化活性指标的测定,探讨酸枣仁生物碱、皂苷部位和两者配伍发挥解郁安神功效的最佳配比及作用机理。方法:1、优化酸枣仁皂苷部位提取分离方法。应用高效液相-二极管阵列检测法(HPLC-DAD),建立酸枣仁生物碱和皂苷部位配伍指纹图谱。初步考察酸枣仁生物碱和皂苷部位配伍血清指纹图谱,为今后谱效相关性研究奠定基础。2、选用失眠和慢性不可预知应激失眠动物抑郁模型,评价酸枣仁生物碱和皂苷部位配伍的解郁安神作用。分别采用荧光分光光度法测定各组小鼠海马、皮层区域单胺神经递质的含量;采用紫外分光光度法测定各组小鼠脑内谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、一氧化氮(NO)等抗氧化指标。为阐明生物碱和皂苷部位配伍的抗抑郁作用机制提供依据。结果:1、根据酸枣仁皂苷特性,对前期设计的酸枣仁系统提取分离方法进行优化,优化后方法所得总皂苷含量大于50%,且水溶性好,有利于小鼠的灌胃给药。生物碱和皂苷部位配伍比为1:1和1:10时,所含皂苷的共有色谱峰峰面积较大。生物碱和皂苷部位配伍血清指纹图谱推测生物碱与皂苷部位配伍后可以促进生物碱中的酸李碱的入血。2、由不可预见慢性应激结合小平台水环境法复制成为失眠抑郁小鼠模型,在悬尾实验和强迫游泳实验中,给药组与模型组相比小鼠TST和FST不动时间显著缩短,差异有统计学意义(P<0.05)。在小鼠自主活动实验中,给药组与模型组相比,活动和站立次数显著增加,差异有统计学意义(P<0.05)。由失眠抑郁小鼠脑海马及皮层中NE、DA、5-HT含量测定结果可知,给药组与模型组相比含量明显降低,有显著性差异(P<0.05)。给药组与模型组相比,体重增长值显著增加,差异有统计学意义(P<0.05)。阈下及阈上剂量戊巴比妥钠协同实验结果表明酸枣仁生物碱和皂苷部位均有催眠功效,且配伍组的催眠功效优于单一部位的催眠功效。结果说明酸枣仁中生物碱与皂苷配伍配伍有一定的解郁安神作用。3、各给药组小鼠脑内总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、过氧化氢酶(CAT)活力与模型组比较均有不同程度的提高(P<0.01),NO含量明显降低(P<0.01)。结论:本研究优化了酸枣仁皂甘部位提取方法,该方法简单、易行,适用于大规模工业生产。建立了生物碱和皂苷部位配伍指纹图谱,并初步考察了生物碱和皂苷部位配伍血清指纹图谱,为进一步的谱效相关性研究及有效组分的确认奠定了基础。经药效学实验证实,生物碱、皂苷部位对小鼠的解郁安神作用具有非线性的量效关系。单胺神经递质含量测量结果表明,生物碱及皂苷部位的抗抑郁作用机制与增加脑内5-HT、NE含量有关。生物碱及皂苷部位可改善失眠和慢性不可预见性温和应激(CUMS)小鼠的抑郁行为,同时能有效降低小鼠脑内NO含量,提高T-AOC、GSH-PX、CAT的活力,提示其抗抑郁作用机制可能与抑制单胺氧化酶活性、清除体内过多的自由基、抗脂质过氧化作用有关。实验结果表明生物碱和皂苷具有确切的协同解郁安神作用,以生物碱中剂量和皂苷中剂量配比为发挥解郁安神效果的最佳剂量。