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背景和目的:胆汁酸特别是次级胆汁酸中的脱氧胆酸(DCA)被认为是胃肠道的致癌因子而日益受到重视。姜黄素(CUR)和黄连素(BER)是具有抗炎作用的中药植物提取物,近期研究发现它们还可能具有抗肿瘤活性。本实验旨在观察这两种药物对脱氧胆酸诱导的人结肠癌HT-29细胞增殖的抑制作用,探讨其可能的抑癌作用机制。 方法:在HT-29细胞中加入200μM脱氧胆酸来诱导癌细胞的增殖。分别加入不同浓度的姜黄素和黄连素,培养6、12、24和48小时。采用氮蓝四唑盐实验(MTT)法测定这两种药物对细胞生长和增殖的影响;用RT-PCR法检测不同浓度姜黄素和黄连素对环氧合酶-2(COX-2)mRNA的抑制作用;用免疫细胞化学染色技术鉴定细胞浆中COX-2的表达;用放射免疫法检测细胞培养液中前列腺素E2(PGE2)的含量。 结果:200μM DCA可以促进HT-29细胞的增殖,并诱导COX-2 mRNA的转录、COX-2蛋白的表达及PGE2的合成。 姜黄素浓度为1μM时,对HT-29细胞生长的抑制率为8.75%;姜黄素浓度≥0.5μM,作用12小时,对DCA诱导的COX-2 mRNA转录有抑制作用;姜黄素浓度≥1μM,作用时间在24-48小时,可以抑制DCA诱导的COX-2蛋白的表达和PGE2的合成;COX-2表达的细胞阳性率与细胞培养液中PGE2的含量呈正相关;姜黄素的作用呈浓度-时间依赖性。 黄连素浓度为1μM时,对HT-29细胞生长的抑制率为7.38%;黄连素浓度≥1μM,作用时间在6-12小时,对DCA诱导的COX-2 mRNA转录有抑制作用;黄连素浓度≥1μM,作用时间在24-48小时,可以抑制DCA诱导的COX-2蛋白的表达和PGE2的合成;COX-2表达的细胞阳性率与培养液中 天津医科大学硕士学位论文PGEZ的含量呈正相关;黄连素的作用呈浓度一时间依赖性。 姜黄素和黄连素比较,两者对HT一29细胞增殖、COX一2表达及PGEZ合成的抑制程度上没有显著差别。但在mRXA水平上,黄连素对COX一2转录的抑制作用强于姜黄素。 结论:姜黄素和黄连素以一种浓度和时间依赖模式抑制DCA诱导的HT一29细胞的增殖、COX一ZmR、A的转录、COX一2蛋白的表达和PGEZ的合成,有希望成为具有广泛应用前景的抗癌新药。