声刺激诱导大鼠嗅球神经前体细胞向耳蜗核迁移、分化的研究

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目的听觉神经系统损伤后的修复是临床亟待解决的问题之一。声刺激有可能诱导听觉系统特异性的修复过程。本课题对耳蜗核移植神经前体细胞的大鼠施加增强的声音刺激,以观察验证上述假设。方法培养嗅球神经前体细胞取自孕14-16d胚胎大鼠,有限稀释法传代并免疫荧光染色鉴定神经干细胞及其分化潜能。耳蜗核定位注射移植Hoechst 33342标记的神经前体细胞,术后将试验组的动物置于增强声环境。不同时间测定听性脑干反应和取材观察移植细胞的存活及分化。结果巢蛋白免疫反应阳性嗅球神经前体细胞在体外可以自我复制传代6月,达40代,并分化出神经元和神经胶质细胞。免疫荧光技术观察到移植后2周耳蜗核Hoechst33342和神经元特异性烯醇化酶(NSE)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、谷氨酸阳性双重标记的移植细胞。增强声环境下标记的神经前体细胞表现出沿听神经根迁移运动的趋势。结论嗅球神经前体细胞移植耳蜗核短期存活良好,并且分化出的神经元表达听觉神经递质,有可能用于听神经损伤修复。
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