神经营养素-3(NT-3)对大鼠坐骨神经离断后腰脊神经节损伤保护作用的实验研究

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背景:神经营养素家族(neurotrophins,NTs)是一类重要的神经营养因子家族,具有重要的维持神经细胞存活和再生的作用,神经营养素-3(NT-3)是其第3个成员,具有广泛的神经营养活性。脊神经节为感觉神经节,内含许多假单极神经元胞体和平行排列的神经纤维束,主要参与肢体的感觉功能。腰脊神经节损伤的修复,是目前医学领域有待解决的难题。目的:本实验通过对大鼠坐骨神经离断来建立腰脊神经节损伤的模型,阐述实验性神经营养素-3(NT-3)在促进腰脊神经节损伤后神经功能恢复方面的作用,为临床治疗腰脊神经节损伤提供理论依据。方法:SD大鼠54只,雌雄不限,随机平均分为三组:假手术组、NT-3治疗组和对照组。假手术组仅仅显露坐骨神经;NT-3治疗组于梨状肌孔下10mm处将坐骨神经锐性离断后逐层缝合,每天皮下注射1ml神经营养素-3(NT-3)(10ug/m1);对照组每天皮下注射与治疗组相同体积的生理盐水。术后对大鼠进行一般观察,于术后4周取大鼠腰脊神经节进行尼氏体染色、HE染色观察脊神经节神经元的病理形态学变化、局部炎症反应情况及Bcl-2、Bax表达阳性率,检测脊神经节神经细胞凋亡情况。结果:一般观察:大鼠坐骨神经离断后,术侧下肢均呈现足下垂畸形、跛行步态等运动功能障碍,随着时间的推进先后出现足趾红肿、散开、皮肤干燥、部分皮毛脱落、溃疡、自噬足趾、肌肉萎缩等失神经营养现象,NT-3治疗组上述现象较对照组略显轻微。NT-3治疗组见近端新生神经直径较对照组粗大。尼氏体染色:坐骨神经切断后,对照组尼氏体溶解消失,数量明显减少,脊神经节神经元着色明显变浅,胞体肿胀,轮廓欠清晰,神经细胞数量明显减少;而NT-3治疗组脊神经节神经细胞染色较假手术组轻度变淡,脊神经节神经元形态结构基本正常,数量减少不明显。HE染色观察:术后对照组脊神经节神经元数量减少、神经元细胞体呈现水肿、空泡样变性、尼氏体溶解神经元染色较淡、核固缩,并有典型细胞凋亡存在,NT-3治疗组脊神经节神经元细胞体水肿变性及凋亡程度较对照组减轻,神经元染色较深。Bcl-2、Bax免疫组化检测:免疫组化Bcl-2、Bax阳性染色为棕黄色,假手术组未见或仅见少量阳性细胞。对照组染色较深,Bcl-2、Bax阳性细胞数较假手术组明显增高(P<0.05),表明损伤严重。 NT-3治疗组Bcl-2、Bax阳性细胞表达数显著低于对照组(P<0.05),表明NT-3对神经节的保护作用明显。结论:坐骨神经离断可以引起腰脊神经节损伤,脊神经节神经元死亡方式主要为细胞凋亡;神经营养素3在维持脊神经节神经元存活、抑制细胞凋亡方面发挥着重要的神经营养性作用。
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