冬凌草不同类型农艺性状比较与品质分析

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目的:实验从农艺性状、化学成分、遗传基因三方面入手,对筛选出的9种农艺性状稳定的冬凌草进行综合评价,有针对性的选育出冬凌草优良新品种。方法:以济源农科院选育出的9种农艺性状稳定的冬凌草为实验材料,采用HPLC法测定9种不同类型冬凌草中次生代谢产物即冬凌草甲素、冬凌草乙素、迷迭香酸含量,对不同类型冬凌草农艺性状、有效成分、产量进行加权评分法对冬凌草植株综合评价,根据评分的高低筛选出冬凌草优良品种。采用软件SPSS17.0对株高、节数/株高、叶片数、叶面积、气孔数、甲素、乙素、迷迭香酸、产量进行相关性分析及聚类分析,明确农艺性状与产量、有效成分之间的相关性。运用ISSR分子标记技术来探讨农艺性状、有效成分的差异是否是由遗传基因的变异所引起并对其进行聚类分析,结合两次聚类分析结果,筛选出冬凌草优良新品种。结果:本实验从冬凌草的外观性状(株高、茎粗、节数、叶面积、叶长、叶宽)以及微观形态特征(上下表皮细胞数、气孔指数、密度等)上揭示了冬凌草农艺性状的差异,研究过程中发现,同一植株冬凌草的叶片也可以出现差异,这反映了冬凌草叶片形态上的多样性,同时也表明了冬凌草是一个叶“多形性”的物种。这种现象的存在可能是冬凌草种质多样性的外在体现,这对于筛选冬凌草优良新品种及保存具有重要的意义。实验表明冬凌草外部形态特征上出现了一定程度的变异,对于其是否产生遗传变异将进行进一步研究。相关性分析结果表明冬凌草产量与叶片数、节数/株高、气孔数呈正相关。采用软件SPSS17.0对各次生代谢产物含量的测定结果进行主成分分析以及聚类分析。聚类分析结果表明,不同类型冬凌草有次生代谢产物差异明显,主成分分析结果表明冬凌草甲素、冬凌草乙素、迷迭香酸均为影响冬凌草品质的主要因素,为冬凌草新品种审订奠定了基础。采用综合评分方法对9种不同类型冬凌草进行综合评价,结果表明其范围在49.7~87.8分,显著性差异较大。其中7号为最高87.8分为第一级种质,其次是3、8、9、4、2号之间没有显著性差异,评分分别为76.8分,76.2分,74.4分,72.8分,71.1分,将此5种类型种质为第二级种质。评分较低的是6、1、5号分别为66.4分,57.0分,49.7分,此3种类型种质为第三级种质。采用改良后的CTAB法提取9种不同类型冬凌草基因组DNA,并对ISSR-PCR反应条件进行优化,通过利用筛选出的12条引物对9种不同类型的冬凌草材料ISSR分析,探讨不同类型冬凌草间遗传分化的关系。建立冬凌草ISSR指纹图谱,计算其遗传距离并绘制出遗传关系树状图。实验结果表明不同类型冬凌草遗传分化较大,其中7号冬凌草遗传距离较大。结论:实验结果表明两次聚类分析的结果不一致,造成这种结果的原因很多,基因的表达受外界环境地理因素的影响,造成农艺性状、有效成分、产量的不同。结合不同类型冬凌草农艺性状比较、有效成分品质分析、基因组ISSR分子标记综合分析,可以明确不同类型冬凌草品质差异较大,为冬凌草新品种的审定提供合理、科学的依据,7号冬凌草在外部形态及有效成分上均优于其他类型冬凌草,两次聚类结果表明7号冬凌草为单独的一类冬凌草。可作为冬凌草优良新品种扩大种植。。
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