急性白血病患者骨髓血中LncRNA TM4SF19-AS1的表达及其意义

来源 :赣南医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wgl_future
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研究目的:此次研究通过检测不同类型以及不同诊治时期的成人以及儿童急性白血病(Acute leukemia,AL)患者中LncRNA TM4SF19-AS1基因的表达量,以及收集诊疗过程中相关临床资料的方式,探究其表达量与急性白血病这个疾病的发生、发展及疗效之间的关系,意于在临床上为AL的诊断方式、治疗方案以及预后等级等方面提供另一种的可能及思路。研究方法:(1)研究对象:实验组为2021年4月至2021年12月在赣南医学院第一附属医院住院的51例急性淋巴细胞白血病(Acute lymphoblastic leukemia,ALL)患者和68例急性非淋巴细胞白血病(Acute non-lymphocytic leukemia,ANLL)患者共119例,再根据疾病进展和治疗所处的时期不同,将实验组分为初治组、缓解组及复发难治组;对照组则选择同期入院的30例非恶性肿瘤患者,其诊断包括缺铁性贫血、巨幼细胞性贫血等,同时收集实验组和对照组患者的骨髓血标本及临床诊疗资料。(2)研究方法:使用红细胞裂解液分离骨髓血中的单个核细胞,使用Trizo L法对骨髓血单个核细胞中的总体RNA进行提取,按照根据美国BIO-RAD公司i Script c DNA Synthesis Kit试剂盒说明书操作逆转录合成c DNA。使用实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR,q RT-PCR)检测骨髓单个核细胞中LncRNA TM4SF19-AS1的表达量。(3)统计学方法:使用SPSS18.0统计软件进行统计分析。正态分布的计量的实验资料以均数±标准差(X±S)表示,两组间统计检验方法使用t检验,多组间比较采用单因素方差分析;不符合正态分布的计量实验资料以中位数、四分位数及范围描述,两组间的比较采用Mann-Whitney U非参数检验,多组间的比较使用Kruskal-Wallis H非参数检验。使用的公式2-△△Ct,计算LncRNA TM4SF19-AS1的相对表达量,△Ct=Ct目标基因-Ct内参,△△Ct=△Ct实验组-△Ct对照组中值。因2-△△Ct的数据不符合正态分布并且(或者)不具备方差齐性,故使用中位数表示非正态计量资料,使用Mann-Whitney U秩和检验来比较组间LncRNA TM4SF19-AS1相对表达量的表达水平的差异,LncRNA TM4SF19-AS1的表达水平和对应的临床资料间使用Spearman秩相关性检验进行分析。P<0.05表明结果差异具有统计学意义。(4)绘图:使用Graph Pad Prism 9.3.1软件进行绘图。研究结果:(1)LncRNA TM4SF19-AS1在AL中的表达量:12.722(0.025~686.614),ALL组相对表达量:15.548(0.091~686.614),在ANLL组相对表达量:11.164(0.025~597.830),在对照组相对表达量:1.035(0.330-1.844)。LncRNA TM4SF19-AS1在AL中的表达量明显高于对照组,且具有统计学意义(P<0.01);LncRNA TM4SF19-AS1在ANLL中的表达量明显高于对照组,且具有统计学意义(P<0.01);LncRNA TM4SF19-AS1在ALL中的表达量明显高于对照组,且具有统计学意义(P<0.01)。LncRNA TM4SF19-AS1在ALL与ANLL中的表达量差异之间,不具有统计学意义(P>0.05)。(2)在初治组、复发难治组、缓解组AL患者骨髓单个核细胞中,LncRNA TM4SF19-AS1表达均较对照组均有所上调。对照组表达量为:1.035(0.330~1.844),初治组表达量为:10.003(0.118~581.706),复发难治组中表达量为:10.395(0.025~576.235),缓解组中的表达量为:23.724(0.118~686.614)。初治组、难治复发组、缓解组骨髓单个核细胞中LncRNA TM4SF19-AS1相对表达量是显著高于对照组的,其差异经过统计分析后,具有统计学意义(P<0.01);缓解组中结果表明,其骨髓血单个核细胞中LncRNA TM4SF19-AS1相对表达量高于复发难治组和初治组,经过统计分析后,其结果表明它们之间的差异有统计学意义(P<0.05);初治组骨髓血的单个核细胞中,LncRNA TM4SF19-AS1相对表达量的结果提示,其与复发难治组之间差异不具有统计学意义(P>0.05)。(3)在急性非淋巴细胞白血病的的不同分型中LncRNA TM4SF19-AS1之间的的表达结果:M0、M2、M3、M4、M5组的相对表达量分别为20.017(2.212~36.140)、10.807(0.118~597.830)、1.579(0.127~236.966)、12.722(0.121~576.235)、11.993(0.025~267.271),其中M3表达量最低,ANLL各亚型之间的表达量经统计分析后,其差异无统计学意义(P>0.05)。(4)将初治AL患者第一次化疗效果进行分组比较,LncRNA TM4SF19-AS1在第一次化疗后完全缓解组和第一次化疗后未完全缓解组中的表达量分别为:10.395(0.025~576.235),23.724(0.118~686.614),CR组LncRNA TM4SF19-AS1表达量低于NR组患者,差异具有统计学意义(P<0.05)。(5)将初治组AL患者以性别、年龄60岁为界、危险度以中低危与高危分组,发现LncRNA TM4SF19-AS1表达水平与患者性别、年龄及危险度之间并无明显差异(P>0.05)。(6)初治AL患者中LncRNA TM4SF19-AS1表达水平与WBC、HGB、PLT、LDH、CRP水平及骨髓原始细胞占比及外周血原始细胞占比均无明显相关性(P>0.05)。结论:(1)LncRNA TM4SF19-AS1在AL患者的骨髓血单个核细胞中存在高表达现象,表现出对AL的诊断价值;(2)LncRNA TM4SF19-AS1在AL患者不同的治疗状态中的表达结果存在差异性,可用于评估疾病状态;(3)LncRNA TM4SF19-AS1对第一次化疗效果评估有一定价值。
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