灵芝自调节物的分离鉴定及其对灵芝酸代谢的影响

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灵芝酸是高等药用真菌灵芝的主要活性化合物,具有抗癌、抗HIV等重要的药理活性,因此其发酵增产成为国内外学者研究和关注的热点。目前与灵芝酸发酵相关的工作主要集中在培养参数的改变、培养基的优化、激发子的添加和菌种的改造等方面,而有关灵芝菌丝体对自身主动调节方面的研究目前尚未见报道。本论文对灵芝的自调节现象进行了研究,拟从自调节的角度寻找使灵芝酸发酵增产的激发子。将灵芝发酵上清液及其提取物分别加入灵芝培养物中静置培养,发现两者对灵芝细胞的生长和灵芝酸的合成均具有促进作用。静置培养9天,灵芝发酵上清液使灵芝细胞生物量和灵芝酸含量比添加新鲜培养基的对照分别提高10.5%、30.2%,灵芝酸产量提高了 43.3%。而灵芝发酵培养12天上清液提取物使灵芝细胞生物量和灵芝酸含量分别提高9.6%、38.7%,灵芝酸产量提高51.5%。说明灵芝菌丝体在发酵培养过程中合成了促进灵芝细胞生长和灵芝酸代谢的自调节物。将分离得到的8种不同提取物分别加入灵芝培养物中静置培养,发现其中4种提取物含有促进灵芝生长和灵芝酸合成的自调节物。经LC-MS鉴定,以上4种浓缩物中均含有4-甲基-5-噻唑乙醇和吲哚乙醛两种物质。4-甲基-5-噻唑乙醇在0.001-1000 μmol/L的浓度范围内对灵芝细胞的生长和灵芝酸的代谢无调节作用,而吲哚乙醛的下游产物吲哚乙酸和色醇对灵芝细胞灵芝酸的合成均具有促进作用。终浓度为1 μmol/L的吲哚乙酸使灵芝细胞总灵芝酸含量提高34.4%,产量提高27.3%;终浓度为100 μmol/L的色醇使灵芝细胞总灵芝酸含量提高38.9%,产量提高30.0%。本论文首次研究灵芝发酵培养过程中的自调节现象,发现灵芝菌丝体在生长过程中合成了促进灵芝自身生长和灵芝酸代谢的自调节物。在灵芝发酵上清液中发现了一种植物激素吲哚乙醛,吲哚乙醛的下游产物吲哚乙酸和色醇均具有促进灵芝酸合成的作用,两者可作为激发子应用于灵芝酸的发酵增产。
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