【摘 要】
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开放式组培在开放有菌的环境中通过添加抑菌剂代替高压蒸汽灭菌锅与超净工作台对培养基进行抑菌,简化了组培环节,降低了生产成本,为工厂化育苗提供了新模式。本研究以徐香猕猴桃为材料,对抑菌剂种类及浓度进行筛选,通过调节琼脂粉添加量、蔗糖添加量、代森锰锌浓度、激素浓度,对培养环节进行优化,包括外植体消毒、诱导腋芽萌发、增殖培养、生根培养等,建立徐香猕猴桃开放式培养体系,为其工厂化育苗提供参考。主要结果如下:
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开放式组培在开放有菌的环境中通过添加抑菌剂代替高压蒸汽灭菌锅与超净工作台对培养基进行抑菌,简化了组培环节,降低了生产成本,为工厂化育苗提供了新模式。本研究以徐香猕猴桃为材料,对抑菌剂种类及浓度进行筛选,通过调节琼脂粉添加量、蔗糖添加量、代森锰锌浓度、激素浓度,对培养环节进行优化,包括外植体消毒、诱导腋芽萌发、增殖培养、生根培养等,建立徐香猕猴桃开放式培养体系,为其工厂化育苗提供参考。主要结果如下:1.徐香猕猴桃传统组培最佳的外植体消毒组合为75%酒精30 s+0.1%升汞9mim,成活率为94.67%。最佳诱导腋芽萌发的培养基为MS+6 g/L琼脂粉+30 g/L蔗糖+0.3 mg/L NAA+2.0 mg/L 6-BA,发芽率为90%。最佳的增殖培养基为MS+6g/L琼脂粉+30 g/L蔗糖+0.1 mg/L NAA+1.5 mg/L 6-BA,成活率为90%,增殖系数为4.72,平均株高为1.58cm。最佳生根培养基为1/2 MS+6 g/L琼脂粉+30 g/L蔗糖+0.7 mg/L IBA,生根率为100%,平均根数为11.58条,平均根长为6.55cm。最佳的移栽基质为腐殖土:蛭石=4:1,成活率为100%。2.筛选琼脂粉添加量为3 g/L。通过抑菌剂种类与浓度的筛选,并改变蔗糖添加量,进行MS、1/2 MS培养基抑菌剂浓度的筛选,得出随着蔗糖添加量的增加抑菌剂浓度也随之增加。通过对徐香猕猴桃增殖和生根培养基最佳代森锰锌浓度进行试验,得出增殖培养中最佳代森锰锌浓度:30 g/L蔗糖+0.15 g/L代森锰锌溶液成活率为86.67%,增殖系数为2.0;20 g/L蔗糖+0.1 g/L代森锰锌溶液成活率为83%,增殖系数为2.79;10 g/L蔗糖+0.08 g/L代森锰锌溶液成活率为66.66%,增殖系数为2.77。生根培养中最佳代森锰锌浓度:30 g/L蔗糖+0.09 g/L代森锰锌浓度成活率为100%,生根率为6.67%;20 g/L蔗糖+0.08 g/L代森锰锌浓度成活率为73.33%,生根率为13.33%;10 g/L蔗糖+0.04 g/L代森锰锌浓度成活率为93.33%,生根率为13.33%。3.开放式外植体消毒的最佳组合为75%酒精30 s+0.1%升汞10 min,成活率为73.33%。开放式诱导腋芽萌发的最佳培养基为MS+3 g/L琼脂粉+30 g/L蔗糖+0.15 g/L代森锰锌浓度+0.2 mg/L NAA+2.0 mg/L 6-BA,发芽率为70%。开放式增殖培养的最佳培养基为MS+3 g/L琼脂+20 g/L蔗糖+0.1 g/L代森锰锌溶液+0.2mg/L NAA+1.5 mg/L 6-BA,成活率为93.33%,增殖系数为6.539。开放式生根培养最佳培养基为1/2 MS+3 g/L琼脂粉+10 g/L蔗糖+0.04 g/L代森锰锌溶液+0.3mg/L IBA,生根率为93.33%,平均根数为4条,平均根长为2 cm。4.对传统组培与开放式组培进行环节及成本的对比。开放式组培和传统式组培都以生产100万株徐香猕猴桃苗为例初步计算。得到开放式组培总共花费631406.56元,传统组培总共花费1033060.12元,传统组培是开放式组培的约1.64倍。开放式组培每株徐香猕猴桃苗单价约为0.63元。传统组培每株徐香猕猴桃单价约为1.03元。单株成本节约了0.4元。
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