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本项目拟采用微型包囊技术研制含畜肠道多种有益菌,活菌数高,活性强,耐胃酸,肠溶性好,常温保存期长的新型高效畜禽用益生菌制剂。本研究从仔猪的肠道和粪便中分离筛选出五种肠道菌,初步鉴定是肠道益生菌,在此基础上对各菌株的发酵特性进行探究。
以PTYG培养基对源材料进行初步分离。选用双歧杆菌增殖培养基,从13和30日龄健康仔猪粪便中分离纯化出双歧杆菌。从10日龄健康仔猪肠道内容物,选用酸化MR.S培养基,分离出乳酸杆菌;选用EC培养基,分离出粪肠球菌;选用麦芽汁培养基,分离出酵母菌;选用BLI培养基,分离出地衣芽孢杆菌。
对五种菌株分别进行镜检观察菌体形态,进行多种生理生化特性实验加以鉴定,并绘制生长曲线。还研究得出双歧杆菌最适初始pH值为7.2,最适培养温度为35℃;粪肠球菌最适初始pH值为9.2,最适培养温度为35℃。
采用正交实验方法确定双歧杆菌最佳培养基配方为酵母膏0.9%,胰蛋白胨0.6%,大豆蛋白胨0.3%,葡萄糖2.5%,双歧因子(低聚果糖)0.3%,生长因子(肝浸液)5%。
在后期研究工作中,确定混合发酵培养基组成及发酵条件和适合产业化规模的高效混合冻干保护剂和冻干优化条件,得到适合于产业化规模微型包囊技术的复合囊材和微型包囊条件。通过猪场实地试验,得到了畜用益生菌制剂产品最佳和剂型,并进行了毒性试验。
结果说明,猪源复合益生菌制剂可明显提高断奶仔猪生产性能和抗病力,是一种可以替代抗菌促长剂的安全无公害饲料添加剂。