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目的通过检测使用达格列净后对棕榈酸诱导的肾小管上皮细胞的细胞活力、凋亡水平、线粒体功能、氧化应激及自噬水平的变化情况,探讨达格列净对糖尿病肾病的保护作用的可能机制。方法（1）使用DMEM/F12完全培养液培养HK-2细胞。在37℃、5%CO2饱和湿度的恒温培养箱中培养。细胞生长密度达70%-80%时传代。细胞分组:正常对照组:用完全培养液培养HK-2细胞;棕榈酸组:使用棕榈酸浓度为150umol/L的培养液培养HK-2细胞;棕榈酸+达格列净组:使用棕榈酸浓度为150umol/L和达格列净浓度为2umol/L的培养液进行HK-2细胞培养;达格列净组:使用含2umol/L达格列净的培养液对HK-2细胞培养。（2）分别将每组HK-2细胞进行检测,细胞活力检测采用CCK8法。线粒体膜电位检测使用JC-1荧光染色。细胞内ROS使用DCF免疫荧光。细胞内氧化应激的检测使用SOD、MDA试剂盒。Western blot检测凋亡蛋白Bax、Cleaved caspase-3和抗凋亡蛋白Bcl-2、胞浆细胞色素C（Cyto C）水平和自噬相关蛋白的蛋白表达量,Hoechst33258荧光凋亡染色及Annexin V-FITC细胞凋亡检测实验技术检测细胞凋亡情况。结果（1）CCK-8法检测达格列净对棕榈酸处理的HK-2细胞的细胞增殖力的影响:与CON组相比,PA组HK-2细胞活力显著下降（P<0.05）,Dapa组HK-2细胞活力差异无统计学意义（P>0.05）。与PA组相比,PA+Dapa组HK-2细胞活力有所升高,差异有统计学意义（P<0.05）。（2）DCF免疫荧光检测达格列净对棕榈酸处理的HK-2细胞内ROS产生的影响:与CON组相比,PA组HK-2细胞内ROS产生增加,差异有统计学意义（P<0.05）,而Dapa组HK-2细胞内ROS无明显变化（P>0.05）;与PA组相比,PA+Dapa组HK-2细胞内ROS产生减少,差异有统计学意义（P<0.05）。（3）JC-1荧光检测达格列净对棕榈酸处理的HK-2细胞线粒体膜电位变化和透射电镜观察线粒体形态的情况:与CON组相比,PA组HK-2细胞红色荧光与绿色荧光强度比值降低,提示线粒体膜电位下降（P<0.05）,Dapa组HK-2细胞线粒体膜电位无明显变化（P>0.05）;与PA组相比,PA+Dapa组HK-2细胞红色荧光与绿色荧光强度比值增加,提示线粒体膜电位升高（P<0.05）。透射电镜显示与对照组相比,PA组线粒体发生肿胀变形,线粒体出现脊断裂,呈空泡样变相比于PA组,PA+Dapa组线粒体形态肿胀减轻,线粒体形态基本正常。（4）SOD和MDA试剂盒检测达格列净对棕榈酸处理的HK-2细胞氧化应激的影响:结果示:与CON组相比,PA组HK-2细胞SOD含量降低（P<0.05）,MDA 水平升高（P<0.05）;Dapa 组 HK-2 细胞内 SOD 和 MDA无明显变化（尸>0.05）;与PA组相比,PA+Dapa组HK-2细胞内SOD水平有所升高,MDA水平下降,差异有统计学意义（P<0.05）。（5）免疫印迹检测达格列净对棕榈酸处理的HK-2细胞凋亡蛋白Bax、Bcl-2、Cleaved caspase-3水平及胞浆Cyto C的变化:结果提示:与CON组相比,PA组HK-2细胞凋亡蛋白Bax和Cleaved caspase-3趋势升高,抗凋亡蛋白Bcl-2趋势降低,胞浆Cyto C蛋白表达量升高,差异有统计学意义（P<0.05）,Dapa组上述指标无明显变化（P>0.05）。与PA组相比,PA+Dapa组HK-2细胞蛋白Bax和Cleaved caspase-3趋势降低,Bcl-2趋势升高,胞浆Cyto C趋势降低,差异有统计学意义（P<0.05）。（6）Hoechst33258凋亡染色和Annexin V-FITC流式细胞术检测达格列净对棕榈酸处理的HK-2细胞凋亡情况结果示:与CON组相比,PA组HK-2细胞凋亡染色荧光强度增加,流式细胞术显示细胞凋亡率增加（P<0.05）,Dapa组HK-2细胞凋亡率无明显变化（P>0.05）;与PA组相比,PA+Dapa组HK-2细胞凋亡染色荧光强度减低,流式细胞术显示凋亡率降低（P<0.05）。（7）免疫印迹检测达格列净对棕榈酸处理的HK-2细胞自噬相关蛋白LC3及Beclin1表达量的影响:结果显示:与CON组相比,PA组HK-2细胞蛋白LC3II和Beclin1趋势升高,差异具有统计学意义（P<0.05）;Dapa组HK-2细胞自噬蛋白表达量无明显变化（P>0.05）;与PA组相比,Dapa+PA组HK-2细胞蛋白LC3Ⅱ和Beclin1趋势降低（P<0.05）。结论达格列净对棕榈酸处理的肾小管上皮细胞具有保护作用,机制可能与改善线粒体功能、氧化应激和调节部分自噬有关。