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川金丝猴被列为国家一级濒危野生保护动物,面临现存数目的极剧下滑,如何优化其在生长、发育及生殖繁育方面的问题引起了研究学者广泛关注。由于物种珍贵且数量稀少,同种核移植受到一定限制,采用异种核移植的方法成功避免了这一问题。异种核移植的成功受核移植操作过程、受体细胞和供体细胞类型的影响,尤其是供体细胞重编程的能力,所以供体细胞的处理对异种核移植的成功起关键作用。随着体细胞多潜能性研究的发展,运用小分子化合物诱导处理对供体细胞进行表观遗传学修饰,提高重编程效率获得了广泛应用。本研究对川金丝猴来源的供体细胞用小分子化合物处理,以山羊卵母细胞为受体进行异种核移植,探究处理前后对异种核移植胚胎体外发育的影响。本研究结果如下:(1)研究材料为川金丝猴耳缘皮肤组织,采用组织块贴壁法分离获得耳缘皮肤成纤维细胞。用合适浓度的小分子化合物对获得的细胞进行诱导处理,从细胞形态、增殖能力、标志性基因的表达水平进行检测。结果发现:分离得到川金丝猴耳缘皮肤成纤维细胞,经过数次传代培养仍能保持较高的活力;PCR显示有胚外内胚层标志基因Sall4和Gata6的表达;Q-PCR定量发现Gata6和Sall4的表达量升高。Gata6在2d、4d、12d的表达量升高显著(p<0.05),尤其第6d和14d表达量升高极显著(p<0.01);Sall4表达量的升高更为明显,在第2 d、4 d、10 d表达量升高显著(p<0.05),尤其第6d、8d、12d和14d表达量升高极显著(p<0.01)。(2)两者融合形成重组异构胚,激活后培养观察胚胎的发育情况并统计各时期数量,Q-PCR和免疫荧光化学染色检测早期发育相关基因的表达,实验发现:形成的川金丝猴-山羊重组异构胚在发育各个阶段处理组和对照组重构胚数量无显著差异(P>0.05);相关标志性基因检测发现:在处理组中Oct4、Prrxl的表达量显著增加(p<0.05),且Sox2、Telemeras的表达量极显著增加(p<0.01),相反Nanog的表达量降低但差异不显著(p>0.05);免疫荧光染色检测重构胚胎OCT-4、SOX-2和NANOG蛋白的表达,处理组中SOX-2的表达水平较高,OCT-4和NANOG表达水平相差不大,在两组间均没有显著性差异(p>0.05)。本研究证明小分子化合物处理能提高胚胎早期发育相关性基因的表达,为之后研究奠定了基础。