钠钙交换体1、3参与远隔创伤后处理的脑保护作用

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目的:应用大鼠局灶性脑缺血再灌注模型研究远隔创伤后处理(remote postconditioning of trauma, Tra-Post)对大鼠脑缺血/再灌注损伤的影响,研究钠钙交换体(sodium-calcium exchangers, NCX)在这种后处理方式中的作用。方法:45只雄性SD大鼠随机分成3组(n=15):假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(I/R组)和适度创伤疼痛6h后处理组(Tra-Post-6h组)。①Sham组:大鼠仅分离颈部血管,不进行大脑中动脉梗阻。②I/R组:采用MCAO模型建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,缺血90min,再灌注24h。③Tra-Post-6h组:MCAO建模并缺血90min,大脑中动脉再灌注开始后的6小时在大鼠腹正中线作2cm的切口,皮肤至腹膜全层切开,之后分层缝合。三组大鼠在再灌注后观察24h,并在再灌注开始后的第6和24h对大鼠行改良的神经功能评分(modified neurological severity score, mNSS);用TTC法测定脑梗死容积;HE染色法观察脑组织形态;Nissl染色法计数存活神经细胞数目;免疫组化及Western Blot的方法观察及测定缺血侧大脑皮层半影区NCX1和NCX3蛋白的表达。结果:①TTC染色:Sham组未见脑梗死;与I/R组比较,Tra-Post-6h组脑梗死容积显著缩小(P<0.05)。②HE染色:Sham组大脑皮层神经元形态正常;与I/R组比较,Tra-Post-6h组脑缺血侧皮层半影区神经细胞层次较清楚,数目多且细胞形态较完整,间质水肿减轻;但是Tra-Post-6h组和I/R组脑缺血半影区细胞数目均较Sham组少。③Nissl染色:Sham组大脑皮层神经细胞数量正常;Tra-Post-6h组缺血半影区内存活的神经细胞数量比I/R组显著增加(P<0.05),Tra-Post-6h和I/R组存活的神经细胞数量均较Sham组显著减少(P<0.05)。④改良的神经功能评分:三组大鼠术前两次和术后两次评分在组间不存在显著差异(P>0.05),各组大鼠的术前和术后两次评分组内比较也不存在统计学意义(P>0.05)。⑤免疫组化及Western Blot结果:Tra-Post-6h组NCX1和NCX3蛋白在缺血侧大脑皮层半影区的表达均显著低于Sham组及I/R组(P<0.05);I/R组和Sham组之间两种蛋白的表达量不存在统计学差异(P>0.05)。结论:远隔创伤后处理可以对缺血再灌注的脑组织产生保护作用;这种脑保护作用可能通过减少NCX1和NCX3蛋白的表达来实现。
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