【摘 要】
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本文采用稀释平板法从6种人参土样和4种校园内土样及2种人参根茎内部及表皮中分离筛选人参锈腐病生防用拮抗放线菌,共分离纯化出115株放线菌菌株,其中42株为拮抗菌株。42株菌株与人参锈腐病菌进行室内对峙实验后发现有23株拮抗菌对人参锈腐病菌菌丝生长抑制率达到了 50%以上,挑选出拮抗效果较好的8株拮抗菌,并对这8株拮抗菌株在高氏一号培养基上的菌落形态特征进行观察记录。复筛的8株拮抗菌株将与9种植物病
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本文采用稀释平板法从6种人参土样和4种校园内土样及2种人参根茎内部及表皮中分离筛选人参锈腐病生防用拮抗放线菌,共分离纯化出115株放线菌菌株,其中42株为拮抗菌株。42株菌株与人参锈腐病菌进行室内对峙实验后发现有23株拮抗菌对人参锈腐病菌菌丝生长抑制率达到了 50%以上,挑选出拮抗效果较好的8株拮抗菌,并对这8株拮抗菌株在高氏一号培养基上的菌落形态特征进行观察记录。复筛的8株拮抗菌株将与9种植物病原菌采用平板对峙法进行室内对峙实验测定拮抗菌株的抑菌谱,综合数据分析来看其中有4株（YBUF5、YBUF7、YBUF15、YBUF76）菌株对9种植物病原菌均具有较高的抑菌作用。对这4株拮抗菌采用恒温摇床法进行发酵浓缩液的制备,将筛选出的4株拮抗菌株发酵浓缩液与9种植物病原菌采用平板纸片对峙法进行室内对峙实验测定菌株发酵浓缩液的抑菌谱,综合数据分析后筛选出了 2株（YBUF5和YBUF7）高效拮抗放线菌菌株。关于YBUF5和YBUF7的菌种鉴定采用经典分类法和分子分类法相结合的手段,对菌株的培养特征、形态特征、生理生化特征进行观察测定,结合YBUF5和YBUF7的16S rDNA序列的同源性比对序列以及基于同源性序列构建的菌株系统发育树,初步鉴定YBUF5菌株为生暗灰链霉菌（Streptomyces caniferus）,YBUF7 菌株为湿链霉菌（Streptomyces humidus）。培养条件对YBUF5和YBUF7菌株及发酵浓缩液抑菌活性影响的研究表明,温度为20～25℃时,YBUF5和YBUF7菌株及其发酵浓缩液对3种人参病原菌的抑菌作用较强,但在30℃时未体现其抑菌作用。在微酸性环境下,YBUF5和YBUF7菌株及其发酵浓缩液对3种人参病原菌的抑菌作用最强,强碱性环境下抑菌作用较弱。营养条件对YBUF5和YBUF7菌株抑菌活性的影响的研究表明,YBUF5和YBUF7两种菌株对3种植物病原菌的生防作用不完全是营养竞争作用。针对YBUF5和YBUF7菌株发酵浓缩液稳定性（温度、pH、紫外线）的研究,结果表明YBUF5发酵浓缩液对热稳定性较差,而YBUF7发酵浓缩液对热稳定性较好,适应的温度范围很宽;YBUF5和YBUF7发酵浓缩液对pH稳定性的范围很宽;YBUF5发酵浓缩液对紫外线稳定性的照射时间范围很宽,而YBUF7发酵浓缩液对紫外线稳定性较差。YBUF5和YBUF7菌株的田间安全性和防病试验在人参出苗后采用人工接菌法进行,待到10月中旬取出参根进行防病效果检验。YBUF5和YBUF7菌株及混合菌株对人参植株没有危害,对人参生长有一定的促进作用。YBUF5和YBUF7菌悬液处理健康人参后人参组织内的人参主要防御酶（过氧化物酶POD、过氧化氢酶CAT、超氧化物歧化酶SOD、苯丙氨酸解氨酶PAL）活性升高。田间防病试验期间,YBUF5和YBUF7菌株对人参锈腐病的防治效果显著,其中YBUF5和YBUF7菌株对人参锈腐病的防治效果最好,其次是YBUF5菌株与YBUF7混合菌株;产量指标方面YBUF5菌株和YBUF7菌株处理的人参产量指标及产量明显高于对照,其中单根重YBUF5菌株优于YBUF7菌株和两者混合菌株。对人参根和叶片中人参主要防御酶活性的测定结果表明:受人参锈腐病菌感染的健康人参根和叶片中人参主要防御酶的含量升高,而配合YBUF5和YBUF7使用的人参根和叶片中人参主要防御酶的含量低于只接人参锈腐病菌却高于无菌水处理。
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