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目的：探讨靶向下调跨损伤DNA合成途径(Translesion DNA Synthesis，TLS)中关键基因REV3L对人结肠癌细胞耐药性的逆转作用。 方法：利用RNA干扰技术靶向下调REV3L基因在人高分化耐奥沙利铂结肠癌细胞系（THC8307/L-OHP）中的表达，以实时荧光定量PCR（qRT-PCR）和免疫细胞化学分别从mRNA及蛋白水平检测REV3L基因下调情况。以基因低表达具有统计学显著性的细胞为实验组。运用甲基噻唑蓝四氮唑盐法（MTT）、流式细胞术、细胞形态学等方法，检测实验组和两个对照组肿瘤细胞耐药增敏、耐药性相对逆转的情况以及细胞凋亡等指标。 结果：转染质粒mU6pro-siREV3的耐药性结肠癌细胞其REV3L基因表达被成功抑制，检测相关指标结果显示：①实验组细胞对奥沙利铂的敏感性增强，耐药系数明显低于空白对照组和阴性对照组；②实验组细胞基因调控后，耐药性的相对逆转率显著高于阴性对照组；③实验组细胞的细胞凋亡率显著高于两个对照组（P<0.05）；各项检测指标，两个对照组比较，存在差异但无统计学意义。 结论：下调REV3L基因的表达，显著逆转了人结肠癌细胞的耐药性并促进了癌细胞的凋亡，故REV3L可作为肿瘤基因治疗潜在靶点和耐药性基因逆转点的重要候选。