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目的:探讨靶向下调跨损伤DNA合成途径(Translesion DNA Synthesis,TLS)中关键基因REV3L对人结肠癌细胞耐药性的逆转作用。 方法:利用RNA干扰技术靶向下调REV3L基因在人高分化耐奥沙利铂结肠癌细胞系(THC8307/L-OHP)中的表达,以实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和免疫细胞化学分别从mRNA及蛋白水平检测REV3L基因下调情况。以基因低表达具有统计学显著性的细胞为实验组。运用甲基噻唑蓝四氮唑盐法(MTT)、流式细胞术、细胞形态学等方法,检测实验组和两个对照组肿瘤细胞耐药增敏、耐药性相对逆转的情况以及细胞凋亡等指标。 结果:转染质粒mU6pro-siREV3的耐药性结肠癌细胞其REV3L基因表达被成功抑制,检测相关指标结果显示:①实验组细胞对奥沙利铂的敏感性增强,耐药系数明显低于空白对照组和阴性对照组;②实验组细胞基因调控后,耐药性的相对逆转率显著高于阴性对照组;③实验组细胞的细胞凋亡率显著高于两个对照组(P<0.05);各项检测指标,两个对照组比较,存在差异但无统计学意义。 结论:下调REV3L基因的表达,显著逆转了人结肠癌细胞的耐药性并促进了癌细胞的凋亡,故REV3L可作为肿瘤基因治疗潜在靶点和耐药性基因逆转点的重要候选。