夹脊电针干预急性脊髓损伤大鼠少突胶质细胞的干细胞潜能效应研究

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目的 通过制备急性脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)模型,观察脊髓损伤后大鼠后肢运动功能情况及神经干细胞向少突胶质细胞前体细胞及成熟少突胶质细胞分化的动态过程,探讨夹脊电针对少突胶质细胞的干细胞潜能效应。方法 选取96只健康清洁级雄性SD大鼠,随机分为假手术组、模型组、电针组和药物组等四组,每组各有24只,各组又按照术后1d、7d、14d等3个时间点随机分配,每时间点各有8只大鼠。假手术组仅手术切除T9-T10节段椎板,不损伤脊髓组织,模型组、电针组和药物组均运用改良的Allen’s法制备急性中重度脊髓损伤模型。造模成功后,假手术组未采取任何治疗,模型组仅腹腔注射生理盐水,电针组则采取夹脊穴电针治疗,电针频率是2/100Hz,每天治疗1次,每次治疗时间设置为20min。药物组采取的是神经节苷脂(GM-1)干预治疗。每个治疗时间点结束后,先行大鼠后肢运动功能评估(Basso,Beattie&Bresnahan locomotor rating scale,BBB评分),再取损伤节段脊髓组织进行免疫荧光双标检测BrdU/nestin(双重标记增殖的神经干细胞)、BrdU/NG2(双重标记增殖的少突胶质前体细胞)和BrdU/MBP(双重标记增殖的成熟少突胶质细胞)的共表达。结果 BBB评分结果显示:术后1d,电针组和药物组与模型组BBB评分结果相比,差异不具有统计学意义(P>0.05);术后7d,BBB评分有显著增高,电针组和药物组与模型组相比,差异具有统计学意义(P<0.05);术后14d,BBB评分同样有显著增高,电针组和药物组与模型组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。免疫荧光双标结果显示.:术后1d,电针组和药物组与模型组相比,BrdU/nestin、BrdU/NG2和BrdU/MBP共表达均不具有显著差异(P>0.05);术后7d,电针组和药物组BrdU/nestin共表达明显增多,与模型组相比,差异具有统计学意义(P<0.05),电针组和药物组BrdU/NG2共表达明显增多,与模型组相比,差异具有统计学意义(P<0.05);术后14d,电针组和药物组BrdU/nestin共表达明显增多,与模型组相比,差异具有统计学意义(P<0.05),电针组和药物组BrdU/NG2共表达明显增多,与模型组相比,差异具有统计学意义(P<0.05),电针组和药物组BrdU/MBP共表达明显增多,与模型组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论(1)急性脊髓损伤后,夹脊电针干预能促进大鼠后肢运动功能的恢复;(2)急性脊髓损伤后,神经干细胞有分化潜能,夹脊电针干预能促进神经干细胞向少突胶质细胞分化。
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