【摘 要】
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DOR(DrOught Resistance)是与金鱼草S-locus F-box(SLF)基因同源的拟南芥SLF超家族的成员AtSFL35。该基因的T-DNA插入突变可以导致拟南芥产生耐旱性。离体叶片失水实验、MS+
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DOR(DrOught Resistance)是与金鱼草S-locus F-box(SLF)基因同源的拟南芥SLF超家族的成员AtSFL35。该基因的T-DNA插入突变可以导致拟南芥产生耐旱性。离体叶片失水实验、MS+甘油培养基实验和盆栽干旱实验都证明dor突变体和野生型相比表现为耐旱。dor的功能互补实验进一步验证了该突变体表型是由于DOR基因的T-DNA插入造成的,表明该基因编码一个耐旱性的负调控因子。定量-PCR结果证明DOR基因组成型表达,但从DOR::GUS转化实验看出,DOR基因在叶子的保卫细胞中特异表达,提示dor表现出的耐旱可能与气孔有关。因此,本文比较了野生型和突变体在正常情况下的气孔大小和干旱条件下KAT1和KAT2的表达,结果显示dor突变体由于相对含水量高而表现为耐旱。为了研究DOR基因突变后耐旱的分子机制,采用Northern杂交方法分析了与耐旱相关的基因DREB2A、RD29A、COR15A和RD22在野生型和突变体中的表达,结果表明dor突变体表现出的耐旱可能与这些基因在干旱胁迫条件下的表达升高有关,提示DOR基因在依赖ABA和不依赖ABA信号通路上都发挥作用。本文从转录水平还发现DOR基因可能也参与了抗寒途径。酵母共转化和pull-down实验证明了DOR在体内可以与ASK14和CULLIN1蛋白形成SCF复合体。这些结果表明,在干旱条件下DOR作为耐旱负调控因子参与泛素/26S蛋白小体降解途径来抑制气孔关闭。
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