黄鳍棘鲷精子冷冻保存及不同月龄的形态性状对体质量的影响

来源 :河北农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hudanrong
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黄鳍棘鲷(Acanthopagruslatus)作为中国南方沿海地区重要的经济鱼类之一,具有重要的商业价值。近年来,水产养殖业虽发展迅速,但水体污染、过度捕捞、栖息地失衡等诸多因素致使其病害情况增多、抗病力降低、种质资源逐渐衰退,因此对其种质资源的保护则至关重要。超低温冷冻保存技术是保护种质资源最直接高效的方法之一,且研究影响体质量的形态性状对选育优良品种具有重要意义,但有关研究较少,需要深入探索。本研究对黄鳍棘鲷精子超低温冷冻保存技术进行优化,并以此为基础检测其精子的运动参数和酶活性,探讨不同月龄鱼体形态特征对体质量的影响,以期为黄鳍棘鲷人工规模化繁育提供指导作用。其主要结果如下:(1)本研究通过采用不同的冷冻保存条件对黄鳍棘鲷精子的活力、运动时间和寿命进行检测,并观察不同保护剂的保存效果。挑选性腺发育良好的雄性亲鱼并轻压其腹部收集精子,利用其活力90%以上的精子作为材料,逐步对其精子冷冻保存的稀释液、葡萄糖浓度、抗冻剂种类及浓度、精子与保护液稀释比例和降温程序等筛选优化。结果表明,以葡萄糖浓度为10 g.L-1的MPRS液为稀释液、5%乙二醇为抗冻剂、稀释比例为1:2以及精子在4℃平衡30 min后置于液氮液面上方熏蒸5 min后投入液氮保存2 h后,将黄鳍棘鲷冷冻精子于37℃水浴解冻后活性最好,精子活力、运动时间和寿命可分别达到(85.17±3.66)%、(9.16±7.70)s和(94.29±9.55)s。(2)本研究检测了不同冷冻保存方法对黄鳍棘鲷精子的运动参数和酶活性的影响。采用已筛选的黄鳍棘鲷精子冷冻保存的方法对精子进行冷冻保存,检测精子的各个参数并评估精子的质量。结果显示,使用CASA系统对冷冻保存前后的黄鳍棘鲷精子的活力(MOT)、曲线运动速度(VCL)、鞭打频率(BCF)等参数进行检测,发现冷冻后MOT、侧摆幅度(ALH)、BCF等指标均显著降低(P<0.05),VCL、直线运动速度(VSL)、摆动性(WOB)等指标无显著差异(P>0.05),其中冷冻前后VCL分别为103 μm·s-1和93 μm.s-1,显著高于VSL,说明黄鳍棘鲷精子主要以曲线的方式进行运动;经过冷冻保存后,精子的过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、肌酸激酶(CK)等活性显著降低(P<0.05),超微量总ATP酶、琥珀酸脱氢酶(SDH)活性无显著差异(P>0.05),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著升高(P<0.05);精子经过二次冷冻处理后,CAT、谷胱甘肽还原酶(GR)、乳酸脱氢酶(LDH)等活性无显著差异(P>0.05),SOD、ATP、SDH活性显著升高(P<0.05),总谷胱甘肽(T-GSH)、CK活性显著降低(P<0.05);将精子分别冷冻保存5、10、15、20天时,发现各种酶活性都有随着冷冻保存时间的延长而下降的趋势。(3)本研究探讨了不同月龄黄鳍棘鲷形态性状对体质量的影响。采用主成分分析和通径分析等方法研究6月龄和18月龄黄鳍棘鲷形态性状的生长规律特征及形态性状对体质量的影响,包括个体体质量(Y)、头长(X1)、头高(X2)、体长(X3)、全长(X4)、体高(X5)、眼径(X6)、吻长(X7)、尾柄高(X8)、尾柄长(X9)等性状。结果表明,不同月龄黄鳍棘鲷各形各态性状与体质量的相关性之间存在差异;月龄组黄鳍棘鲷第一主成分中,全长和体长分别是较大的特征量,表明6月龄和18月龄黄鳍棘鲷的生长特性是以增长为主;6月龄的体高和18月龄的头高分别对体质量有显著的直接影响,并建立相应2个月龄组不同形态性状对体质量的回归方程:6月龄:Y=-7.287+6.612X5(R2=0.335),18月龄:Y=-158.321+42.452X2+16.177X9(R2=0.600)。本研究结果为保护黄鳍棘鲷的优良种质资源、建立冷冻精子库提供一定的科学依据,为黄鳍棘鲷精子冷冻损伤机制的研究提供参考;在黄鳍棘鲷遗传育种研究中,掌握不同形态性状间的相互关系对其选育具有较好的辅助效果,为黄鳍棘鲷的人工苗种选育提供理论支持。
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