中药复方“仙灵骨葆”抗骨质疏松物质基础研究

来源 :沈阳药科大学 | 被引量 : 7次 | 上传用户:huhuairen
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中药复方制剂"仙灵骨葆"胶囊是由淫羊藿、续断、丹参、补骨脂、知母、地黄六味中药组成的复方中成药制剂。在临床上,主要用于骨质疏松症的预防和治疗。本文采用去卵巢C57BL/6J小鼠骨质疏松模型,以腰椎椎骨的骨微观结构为考察指标,重现了中药复方制剂"仙灵骨葆"胶囊的60%乙醇提取物XLGB的抗骨质疏松作用,并从提取物经大孔吸附树脂HP-20色谱柱的分离馏分中,确定馏分XLGB-B(30%乙醇洗脱物)和XLGB-C(95%乙醇洗脱物)为"仙灵骨葆"提取物的抗骨质疏松的活性部位。综合运用硅胶柱色谱、ODS柱色谱、SephadexLH-20柱色谱、HW-40柱色谱以及反相HPLC等多种色谱学分离手段,从活性部位中共分离得到了 61个化合物,并通过理化性质和现代波谱学手段鉴定了它们的结构,其中包括35个黄酮类化合物,5个皂苷类化合物,5个香豆素类化合物,4个木脂素类化合物,3个环烯醚萜苷类化合物,5个酚酸类成分,及4个其他类成分。其中,2"-O-rhamnosylcaohuosideC(35),4"-O-acetyl-3"-O-xylopyranosyl ikarisosideA(37),3"-O-xylopyranosylepimedosideA(38),hydroxylepimedin C(40),4’-metho xylkaempferol 3-O-[α-L-rhamnopyranosyl(1→2)-α-L-rhamnopyranoside]-7-O-β-D-glucopyrano side(41)为5个新的黄酮苷类化合物。分别以促进骨形成、抑制骨吸收、抑制前成脂细胞成脂分化为指标,对分离得到的38个化合物(化合物1-28,37,42,47-49,52-54,57,59)进行了体外抗骨质疏松相关活性的评价。实验结果提示,异戊烯基黄酮及其苷类成分(化合物17-28,37,42,47-49)具有促进骨形成、抑制骨吸收的双重骨代谢调节作用,并可抑制前成脂细胞向脂肪细胞分化;常春藤皂苷类成分(化合物57,59)具有促进骨形成、抑制骨吸收的双重骨代谢调节作用;酚酸类、环烯醚萜类、木脂素类和香豆素类成分(化合物1-16,52-54)具有促进骨形成的作用。同时,本文采用高效液相-高分辨多级质谱联用技术对"仙灵骨葆"提取物中的化学成分进行了快速检识。综合紫外光谱、高分辨质谱及多级质谱碎裂和丰度等信息,结合文献报道的六味单味组方中药原植物的化学成分和各类化合物的质谱裂解规律,推测了 117个成分的化学结构,其中16个为可能的新化合物(其中5个已分离得到),并通过分离得到的61个化合物对上述推测进行了验证,从而进一步丰富了对"仙灵骨葆"提取物中的化学成分的表征。上述工作部分揭示了"仙灵骨葆"抗骨质疏松的物质基础,为制定科学合理的质量控制方法提供了依据,也为复方的药效物质基础的研究提供了一种可能的思路与方法。
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