微波辅助提取-高速逆流色谱分离纯化花生衣中总黄酮

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本文研究了微波辅助提取花生衣中总黄酮的方法,探讨了用高速逆流色谱法(High-speed counter-current chromatography, HSCCC)对花生衣中总黄酮提取物进行分离纯化的可行性,通过相对简单的工艺方法,得到了原花色素和儿茶素2种化合物,并用HPLC、IR、LC-MS、1HNMR等方法表征。  1.研究了微波辅助提取花生衣中总黄酮的工艺方法,探讨了不同提取方法和工艺条件对花生衣中总黄酮提取率的影响,确认微波辅助提取法效果较好。在单因素实验基础上,通过正交试验优化了花生衣中总黄酮的提取条件:提取功率为690 W,最佳提取时间为40 s,乙醇浓度为55%,料液比为1︰20,提取次数2次。总黄酮最大提取率为3.18%。  2.探讨了用高速逆流色谱法分离纯化花生衣中总黄酮提取物的可行性。根据总黄酮提取物在溶剂体系中的分配情况及分离效果,确定选用正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水溶剂体系(体积配比2︰5︰2︰5),以上相为固定相,下相为流动相。通过单因素实验,探讨了流动相流速和主机转速对固定相保留率的影响,确定最佳流动相流速为1.5 mL/min,主机最佳转速为800 r/min,固定相保留率可达40%以上。  3.通过高速逆流色谱法从花生衣中总黄酮提取物中分离出2种组分,用HPLC法鉴定,组分1和组分2的纯度分别为99.84%和82.94%。分别用IR、LC-MS和1HNMR法进行初步表征,推测组分1为原花色素,组分2为儿茶素。  微波辅助提取花生衣中总黄酮的提取率较高。高速逆流色谱法可对花生衣中总黄酮进行较有效的分离纯化,对天然产物有效成分的分离纯化具有一定应用价值。
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