葡萄霜霉病抗性QTL定位及候选基因分析

来源 :沈阳农业大学 | 被引量 : 5次 | 上传用户:yydxpjg
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葡萄霜霉病是由葡萄单轴霉属[Plasmopara viticola(Berk.et Curtis)Berl.et de Toni.]真菌侵染造成的多循环病害,在全国各葡萄产区传播,高温多湿是引起该病流行的主要因素。本试验以欧亚种‘红地球’与山葡萄‘双优’的杂交后代群体和欧亚种‘霞多丽’与山欧杂种‘北冰红’的杂交后代群体为试验材料,对2个群体进行抗病性鉴定,开展葡萄霜霉菌抗病性QTL定位研究。通过对主效QTL区间的候选基因分析,筛选出与抗性有关的候选基因,并应用荧光定量PCR技术进行候选基因功能的表达验证。主要研究结果如下:连续两年采用室内离体叶片鉴定的方法,对‘红地球×双优’杂交产生的149株F1代群体和‘霞多丽×北冰红’杂交产生的130株F1代群体进行霜霉病抗性鉴定。结果表明:亲本‘红地球’和‘霞多丽’表现出高感;‘双优’和‘北冰红’出表现高抗。群体后代表现出5个级别:免疫、高抗、中抗、感病和高感,‘红地球×双优’杂交后代单株的表型级别平均占:2.03%、27.70%、48.31%、17.57%、4.39%,其中抗级别和感病级别以上的单株分别78.04%和21.96%,后代中出现3株免疫单株;‘霞多丽×北冰红’杂交后代单株的表型级别平均占:0%、3.08%、48.85%、40.39%、7.69%,而中抗级别和感病级别以上的单株均分别51.93%和48.07%,未出现免疫单株。从整体上看,‘红地球×双优’杂交后代的抗病性高于‘霞多丽×北冰红’杂交后代,后代的抗性遗传受亲本影响较大。此外,跟据2个群体后代单株表型级别分布比例可看出,抗病性发生显著分离,符合数量性状遗传的特征,抗性评价表型能用于霜霉病QTL定位。基于已创建好的‘红地球×双优’和‘霞多丽×北冰红’杂交群体的分子遗传图谱,通过MapQTL5.0筛选出LOD≥3.0的葡萄霜霉病抗性QTL位点。在2个群体中共得到27个QTL,其中在群体‘红地球×双优’整合图谱检测到8个QTL,2016年分布在LG15上,2017年分布在LG11和LG15连锁群上;在群体‘霞多丽×北冰红’整合图谱上得到19个QTL,2016年和2017年均分布在LG1、LG5、LG7、LG9、LG13、LG17连锁群上。根据霜霉病抗性QTL定位结果,结合葡萄参考基因组信息,经过生物信息学分析,在定位区段内筛选出5个抗病候选基因:MAPK、VvLRR、TIR、RPM1和F-box基因。利用了荧光定量PCR分析了5个候选基因在抗病品种‘双优’、‘北冰红’以及感病品种‘红地球’、‘霞多丽’不同侵染时期的表达量,发现在‘霞多丽’、‘北冰红’的TIR、F-Box候选基因表达量差异最为显著,VvLRR、RPM1候选基因次之,MAPK候选基因在‘红地球’和‘双优’上表达差异明显,而VvLRR候选基因表达量差异不明显。整体来看,5个基因因在抗病品种中的表达量普遍高于感病品种。
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