嵌合抗原受体T细胞（CAR-T）疗法在血液恶性肿瘤的治疗中取得了显著的成功,目前FDA批准了几种产品用于急性B细胞白血病（B-ALL）、大B细胞淋巴瘤和多发性骨髓瘤。然而,CAR-T技术的临床应用存在两个限制:体外复杂的制备过程和细胞因子释放综合征（CRS）。目前,获得CAR-T细胞需要复杂的过程和严格的质量控制。此外,用于临床应用的CAR-T细胞的制备需要为每个患者定制并遵循药品生产质量管理规范（GMP）。CAR-T疗法的另一个挑战是由IL-6引起的细胞因子释放综合征（CRS）。在本研究中,我们构建了一个表面经CD3抗体修饰的脂质纳米粒系统,装载了含有白细胞介素6短发夹RNA（IL-6sh RNA）和CD19-CAR（Anti CD3-LNP/CAR 19+sh IL6）组合基因的质粒。该递药系统通过CD3抗体的介导靶向T细胞,在核定位肽MTAS-NLS的影响下稳定转染T细胞,将其转化为IL-6敲除的CAR-T细胞,从而杀伤CD19高表达的白血病肿瘤细胞,减少IL-6引起的CRS。体内实验表明,Anti CD3-LNP/CAR19+sh IL6能稳定转染T细胞,并在90天内产生CAR-T杀伤肿瘤。这显著延长了白血病模型小鼠的存活时间,并证明了所制备的LNP表现出与体外制备的传统CAR-T细胞相同的抗肿瘤效果。同时,IL-6的表达被沉默,这将有助于减少CRS,提高CAR-T治疗的安全性。该技术避免了传统CAR-T技术复杂的体外制备过程和严格的质量控制,降低了技术壁垒和生产成本。该方法提高了使用CAR-T技术的便利性,有助于进一步促进CAR-T的临床应用。尽管嵌合抗原受体T细胞（CAR-T）疗法对血液瘤展现了良好的治疗效果,但CAR-T在治疗实体瘤方面却遇到了瓶颈,对实体肿瘤的治疗效果有限。这时,基于CAR-T和CAR-NK疗法,利用巨噬细胞吞噬的特性,嵌合抗原受体-巨噬细胞（CAR-M）疗法开始迅速发展,并对实体瘤显示出良好的治疗效果。但目前CAR-M离体制备与CAR-T细胞的制备类似,生产工艺复杂,成本高,并且生产的CAR-M细胞无法在体内增殖。这严重限制了它的临床应用。因此,我们从体内直接产生CAR-T细胞的研究中获得启发,再次利用脂质纳米粒（LNPs）递送系统,包载靶向抗原Trop2的CAR（LNPs/CAR Trop2）,用于体内直接产生CARM细胞,吞噬Trop2抗原高表达的肿瘤细胞来治疗实体肿瘤。并且利用巨噬细胞可以呈递抗原的特性,刺激体内的CD8+T细胞也发挥杀伤作用。结果表明,静脉注射或者瘤内注射LNPs/CAR Trop2后,该纳米粒可在肿瘤部位蓄积并稳定转染巨噬细胞,将其转导为CAR-M细胞,且大部分为M1型。这些在体内产生的CAR-M细胞可以杀伤Trop2抗原高表达的肿瘤细胞,降低了荷瘤小鼠的肿瘤负荷。通过这种方法,CAR-M细胞可以在注射LNPs后直接在体内产生,避免了目前复杂的体外制备流程。我们将纳米递药系统在体内递送时容易被血液、肝脾肺和肿瘤组织中单核巨噬细胞吞噬的“劣势”转化为使巨噬细胞改造成CAR-M细胞的“优势”,解决了CAR-M体外制备的难题,为CAR-M治疗提供了一种新颖、便捷的实施方案,可加速推进CAR-M疗法在实体瘤治疗中的临床应用进程。总体而言,本论文针对CAR-T及CAR-M疗法临床应用中存在的体外制备过程复杂、潜在细胞因子释放综合征及实体瘤治疗效果有限等挑战,设计用脂质纳米颗粒在体内产生IL-6敲减的嵌合抗受体T细胞或嵌合抗原受体巨噬细胞。该Anti CD3-LNP/CAR19+sh IL6递药系统在CD3抗体的介导下可以靶向T细胞,将其转化为IL-6敲除的CAR-T细胞,从而杀伤CD19高表达的白血病肿瘤细胞,减少IL-6引起的CRS。另外,包载靶向抗原Trop2的CAR的LNP递药系统（LNPs/CAR Trop2）,可在体内直接产生CAR-M细胞,吞噬Trop2抗原高表达的肿瘤细胞来治疗实体肿瘤。这项体内产生CAR-T/CAR-M的技术避免了传统CAR-T技术复杂的体外制备过程和严格的质量控制,降低了技术壁垒和生产成本,有助于进一步促进CAR-T/CAR-M的临床应用。