人工授精是一项发挥优秀公畜遗传潜力的重要现代动物生物技术。猪精液长效保存技术的研究目的正是为了提供人工授精技术所需的品质较高的精液，以便发展和推广人工授精技术在现代养猪业中的应用。猪精液长效保存技术可以尽可能的延长精子的保存时间，使得人工授精技术不受时间、地域的限制，便于开展国内、国际间种质资源交流，提高优良种猪的利用率，加快品种的改良，在猪育种、猪种资源的保护等方面具有着重要的现实意义。 本论文研究内容主要有以下三个部分：第一部分，以精子活力为指标，筛选出常温保存效果较好的稀释液作为基础配方，从HEPES、谷胱甘肽和半胱氨酸中筛选出合适的添加物，并且确定其最佳添加浓度，开发出新型稀释液延长猪精液的常温保存时间。第二部分，添加卵磷脂或者低密度脂蛋白来代替低温稀释液中的卵黄成分，比较精液低温保存的效果，研究卵磷脂和低密度脂蛋白能否替代卵黄成为抗冷物质，以便开发无动物源的新型稀释液。第三部分，通过研究冷冻稀释液、冷冻精液的剂型、甘油浓度、离心速度、精子密度和解冻液对精液冷冻的影响，最优化冷冻程序，以提高冻后精子活力，并且通过观察冻精的超微结构探索精子冻伤可能的机制。 本实验第一次证明了HEPES有利于猪精液的常温保存，确定了HEPES的最佳添加量，延长猪精液常温保存时间至5天；发现了低温稀释液中不能使用卵磷脂代替卵黄，低密度脂蛋白是卵黄的主要抗冷休克物质；优化了冷冻程序，操作步骤为；鲜精以1000转/分钟离心10分钟后去精清，使用含果糖和3％甘油浓度的冷冻稀释液对精子进行稀释，调节精子密度为1.5×109，以细管法制作冻精，最后用添加了咖啡因的解冻液对冻精进行解冻，这样获得的冻后精子活力在0.35以上，提高了猪冻精的活力；发现冷冻对精子超微结构的影响主要集中在精子头部，表现为质膜膨胀，顶体内外膜成囊泡状，质膜破裂释放细胞内容物，发生假顶体反应。