现阶段,安全、特异性强、药效高、价格便宜的溶血栓药物是研究的热点。尤其是从微生物中得到的溶栓药物,具有许多优点,如使用比较安全、分子量小,容易被吸收。本论文从菌株的复壮开始,主要做了以下研究工作。在复壮过程中,得到一株在酶活力为482U/mL菌株rHQ-9,在平板上观察菌落的形态:微黄色或灰白色,表面有褶皱,中间偶有规则的环形凸起,成圆形,不透明。内部湿润,用接种针挑起时,呈拉丝状。并通过显微镜观察,菌体呈短杆状,两端钝圆,个体微小芽孢明显,芽孢多为中生,形态呈椭圆或柱状,生有鞭毛,可以运动,这与最初筛选得到的菌种相同,可以断定这与原始菌是同一菌株,为枯草芽孢杆菌。在对菌种rHQ-9产纤溶酶的提取与纯化研究过程中,发酵液经过硫酸铵分级沉淀、碱与透析处理、离子交换处理、凝胶过滤等提取纯化步骤得到了电泳纯的纤溶酶,酶比活力为9561U/mg,酶活回收率达到15%。经SDS-PAGE凝胶电泳与凝胶柱测得其分子量是26012Da,且是单链的蛋白质。通过飞行质谱检测,在NCBInr库中检测到五类能够水解蛋白质的酶,可以推测此纤溶酶也有相同功能,即具有水解纤维蛋白,溶解血栓的功能,这与最初研究相符。又根据对此纤溶酶酶学性质的研究,可以初步断定此纤溶酶蛋白分子是一种新发现的蛋白,与先前发现的有明显的不同。该纤溶酶对对温度敏感,对温度耐受性较差,当温度低于35℃时,有较好的稳定性,但当温度超过45℃以后则迅速失活。该酶的最适反应温度在45℃~50℃。但是在此反应时,酶容易失活,故此酶在利用时,酶促反应温度应该设在35℃左右。该纤溶酶的pH稳定区间为6.0到11.0,最适酶促反应为8.0,尤其当pH大于9.0时,其稳定性更加良好。蛋白酶抑制剂如PMSF、EDTA对该纤溶酶抑制作用都较明显,且随着浓度增加抑制力也增加。表明此纤溶酶是丝氨酸蛋白酶,它的活性中心依靠金属离子激活,属于金属蛋白酶一类。其它蛋白酶抑制剂对此纤溶酶的抑制作用不明显。Zn2+、Cu2+、Fe3+对纤溶酶酶活力有明显的抑制作用,尤其是高浓度Cu2+、Fe3+能完全抑制纤溶酶的酶活力;低浓度和高浓度Mg2+、Ca2+均对纤溶酶酶活力有促进作用;低浓度Mn2+对纤溶酶酶活力有促进作用,但高浓度Mn2+对纤溶酶酶的活力有轻微的抑制作用。利用经过加热的纤维蛋白平板和未经加热的纤维蛋白平板测定纤溶酶酶活力,结果表明此纤溶酶不是激酶,它是直接作用纤维蛋白并将其直接分解。通过SDS-PAGE凝胶电泳分析表明,该纤溶酶对纤维蛋白α链分解迅速,对β链的分解速度次之,分解Y-Y链的速度最慢。在安全性检测中,发现发酵液中存在溶血现象,对发酵液进行提取与纯化后对纤溶酶进行溶血性检测,发现纤溶酶无溶血现象,初步判定纤溶酶是安全的,不会使血细胞发生溶解。