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目的:人参皂苷Rg1(Ginsenoside Rg1)是从中药人参中提取出来的单体成分,具有抗衰老、抗氧化、抗纤维化的功能,并具有类雌激素样活性。与现在常用治疗卵巢早衰(premature ovarian failure POF)的方法激素补充治疗(menopausal hormone therapy MHT)比较副作用较小,并可能改善POF的生殖功能。本研究采用致衰剂D-半乳糖(D-galactose D-gal)建立POF小鼠模型,在建模过程中,当动情周期紊乱时加用Rg1进行治疗,观察其治疗效果,希望为恢复卵巢功能寻找一种新的治疗方法并探讨其作用机制。方法:1、建立POF小鼠模型:选取具有正常动情周期C57小鼠,分为四组,每组10只,四组分别是:正常对照组、低剂量组(D-gal100mg/kg/d)、中剂量组(D-gal 200mg/kg/d)、高剂量组(D-gal300mg/kg/d)。处理过程中观察动情周期;眼眶取血测血清卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone FSH),雌二醇(Estradiol 2 E2)、抗苗勒管激素(Anti-Mullerian hormone AMH);称取小鼠体重,卵巢和子宫的重量,计算子宫卵巢的重量系数,HE染色计数各级卵泡数和黄体数,筛选出最佳建模剂量。2、Rg1对生殖系统的作用:选取有正常动情周期的C57小鼠100只,分为四组,每组25只,四组分别是:生理盐水组,Rg1+D-gal组/延缓衰老组,Rg1组,D-gal组/衰老组。观察动情周期变化;眼眶取血测血清性激素;称取小鼠重量,子宫卵巢重量,计算子宫卵巢重量系数;子宫卵巢HE染色,计数各级卵泡和黄体数,观察子宫内膜厚度;子宫卵巢透射电镜观察超微结构变化;检测子宫和卵巢抗氧化指标总超氧化物歧化酶(superoxide dismutase T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase GSH-Px),氧化指标丙二醛(malondialdehyde MDA)和炎性指标白介素-1β(Interleukin-1βIL-1β)、白介素-6(interleukin-6 IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-αTNF-α);免疫组化检测卵巢颗粒细胞上卵泡刺激素受体(follicle-stimulating hormone receptor FSHr)的表达,并进行定量分析;WB检测卵巢FSHr、P53、P21、P19、P16蛋白的表达量;RT-PCR检测卵巢衰老因子P53、P21、stk,子宫衰老因子Bax、bcl-2 m RNA的表达;合笼实验,每组选取10只小鼠与雄鼠合笼,计数3个分娩周期幼鼠的数量;合笼实验前后D-gal组小鼠肺、肝脏、脾、肾脏HE染色检查,比较其形态学变化。结果:1、复制POF小鼠模型D-gal剂量的筛选实验中,中剂量和高剂量组FSH明显升高,E2、AMH明显降低,卵泡数和黄体数都明显减少,均达到了POF的标准,故本实验后续研究采用中剂量组。2、Rg1对生殖系统的作用研究结果:从注射D-gal的第三周开始衰老组动情周期紊乱,延缓衰老组在整个处理过程中动情周期无明显变化;衰老组卵巢、子宫的重量系数低于延缓衰老组,延缓衰老组与Rg1和生理盐水组无明显差异;卵巢HE染色,衰老组各级卵泡数和黄体数明显减少,延缓衰老组卵泡和黄体数恢复正常,透射电镜衰老组卵泡颗粒细胞中见大量凋亡小体,间质中见坏死组织,延缓衰老组卵泡颗粒细胞未见明显凋亡小体,间质中未见坏死组织;子宫透射电镜,衰老组子宫肌层见大量纤维化,子宫内膜变薄,延缓衰老组子宫的纤维化程度减轻,内膜见腺体结构;衰老组子宫和卵巢上抗氧化指标T-SOD、GSH-Px明显降低,氧化指标MDA明显升高;炎性指标IL-1β、IL-6、TNF-α升高;颗粒细胞上FSHr蛋白的表达量降低;卵巢上P53、P21、P19、P16蛋白表达量明显升高;卵巢上衰老基因P53、P21、stk,子宫上衰老因子Bax、bcl-2 m RNA的表达量明显升高。然而,与衰老组相比较,延缓衰老组抗氧化指标明显升高,氧化指标,炎性指标明显降低,颗粒细胞上FSHr蛋白的表达量增高,子宫和卵巢上衰老因子蛋白和m RNA的表达明显降低。延缓衰老组与生理盐水组,Rg1组在上述指标比较无明显差异。合笼实验前,衰老组肺、肝脏、肾脏、脾HE染色都有明显的炎性改变,经合笼试验这段时间的修复,衰老组肺、肝脏、肾脏、脾的炎性改变已经明显恢复,但是检测三周期分娩幼鼠的数量,衰老组分娩幼鼠的数量随分娩次数增多而逐渐减少,D-gal对生殖功能的影响并没有随时间延长而好转。但是,延缓衰老组分娩幼鼠的数量并未受影响。结论:Rg1通过抗氧化,抗炎性损伤减轻POF小鼠模型卵巢和子宫的病理损害,并通过上调颗粒细胞上FSHr的表达,减少颗粒细胞凋亡,抑制卵泡闭锁,下调衰老信号通路P53-P21-P19/stk、P16、Bax-bcl-2表达改善POF小鼠模型的生殖功能。