糖皮质激素对大鼠脊髓损伤后转化生长因子β1表达的影响

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目的:糖皮质激素是目前治疗脊髓损伤的最常用的药物,大量的实验和临床结果证实了它的有效性。尤其是近年来人们甲基强的松龙(Methylprednisolone,MP)的临床应用的结果更是受到人们的关注。近来的实验研究表明TGF-β1与脊髓损伤关系密切,能够明显减轻脊髓的继发性损伤,对脊髓损伤具有保护作用。本研究主要是观察研究TGF-β1在脊髓损伤中的表达及作用以及不同剂量糖皮质激素对脊髓损伤中TGF-β1表达的影响以便了解TGF-β1在糖皮质激素对脊髓损伤治疗机制中是否有重要作用。 方法:制作大鼠脊髓损伤模型,并给予不同的处理,并在不同的时段采取脊髓损伤标本,并利用免疫组化和原位杂交方法进行研究,研究糖皮质激素对TGF-β1蛋白及TGF-β1mRNA表达的影响。本实验分三部分:(一)大鼠脊髓损伤模型的制备(二)利用免疫组化方法研究糖皮质激素对脊髓损伤中TGF-β1蛋白表达的影响;(三)应用原位杂交方法研究糖皮质激素对脊髓损伤中TGF-β1mRNA表达的影响。将雄性SD大鼠85只,随机分成空白对照组5只、损伤未处理组(6h、24h、3d、7d各5只)、小剂量地塞米松组(6h、24h、3d、7d各5只)、大剂量地塞米松组(6h、24h、3d、7d各5只)、甲基强龙处理组(6h、24h、3d、7d各5只),然后制作脊髓损伤模型,分别给予小剂量地塞米松(0.5 mg/kg)、大剂量地塞米松(20mg/kg)、甲基强的松龙 (30 mg/kg),损伤对照组及空白对照组给予等渗盐水。分别于伤后6h、24h、3d、7d取材,然后做HE、免疫组化,原位杂交观察大鼠脊髓损伤后糖皮质激素对TGF-β1蛋白及TGF-β1mRNA表达的影响。 结果:脊髓损伤组在伤后各时段TGF-β1蛋白及TGF-β1mRNA的表达同未损伤组相比,明显增加。小剂量地塞米松、甲基强的松龙均能抑制脊髓损伤后TGF-β1的表达,同损伤对照组相比有显著差异(不同时段差异P<0.01或P<0.05),并使‘篇二军医丈笋颐毖学世讼戈TGF一pl的表达峰值时间前移。小剂量地塞米松、甲基强的松龙与大剂量地塞米松处理组之间差异显著(不同时段差异P<0 .01或P<0 .05)。其强度为:甲基强的松龙>小剂量地塞米松。大剂量地塞米松促进TGF一pl的表达。三者之间差异显著。小剂量地塞米松、大剂量地塞米松、甲基强的松龙对TGF一p 1 mRNA的表达的影响与对TGF一pl的表达的影响一致,说明糖皮质激素是在mRNA水平上调节TGF一pl的表达。 结论:脊髓损伤后,TGF一盯的表达增加。小剂量地塞米松、甲基强的松龙在治疗脊髓损伤时,一定程度的抑制了脊髓损伤后TGF一pl的表达,削弱了内源性TGF一甲对脊髓继发性损伤的保护作用。大剂量地塞米松促进内源性TGF一pl的表达,具体机制尚不清楚。这说明地塞米松对TGF一pl的表达的影响与剂量有关。
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