卵巢癌是最常见的妇科肿瘤之一。该肿瘤发病十分隐匿,早期很难察觉,发现时一般都处于临床晚期；此时,多数肿瘤都已发生不同程度的转移,手术难以根除,且术后常有复发。因此,卵巢癌被认为是预后最差的妇科恶性肿瘤之一。深入研究原发性卵巢癌的转移、复发机制,并积极探索有效的治疗措施成为当前原发性卵巢癌诊治中迫切需要解决的重点问题。上皮细胞钙粘蛋白(E-cadherin)是Cadherin家族中的主要成员,在极化上皮细胞之间的粘附中起了主要作用。不同的组织器官中E-cadherin的表达具有一定的特异性。有研究表明,作为肿瘤转移抑制分子,E-cadherin的表达减少不仅与肿瘤的发展及转移形成有关,而且通过激活WNT／β-连环蛋白信号转导系统促进特定癌基因如c-myc, cyclinD1之类的过表达而促进肿瘤的发展。目前对E-cadherin的认识仍然处于起步阶段,其结构、功能的特异性及与细胞内、外其它物质之间的相互作用关系、调节机制等仍未完全明了,E-cadherin在卵巢癌的发生、发展过程中所起的具体作用仍不清楚,确切的发病机制也有待进一步探讨。Claudins是构成紧密连接的骨架蛋白,可以维持紧密连接所特有的栅栏和屏障功能。肿瘤通常会伴随着紧密连接破坏而发生,从而使肿瘤细胞间黏附作用减弱以及侵袭力增强。Claudin-3是紧密连接的主要跨膜蛋白,该蛋白在细胞间传输转运中起重要的接头作用,是细胞黏附功能的基础。研究表明Claudin-3在众多肿瘤组织中异常表达,提示Claudin-3的异常表达很可能与肿瘤发生、发展密切相关。然而目前Claudin-3在卵巢肿瘤中的表达及作用尚不完全清楚,有待进一步研究。本实验通过免疫组化和荧光定量PCR检测E-cadherin和Claudin-3在上皮性卵巢癌中的蛋白表达和]nRNA水平情况,及其在卵巢癌中的表达与患者的年龄、病理类型、FIGO分期、组织分化、有无腹膜转移等临床病理特征之间的关系；以及E-cadherin和Claudin-3在卵巢癌中的表达与患者5年生存率之间的关系,从而进一步了解E-cadherin和Claudin-3的表达与上皮性卵巢癌的侵袭、转移之间的关系,以期为临床上皮性卵巢癌的诊断治疗,及预后评估提供理论依据。研究方法：1、采用免疫组化S-P法检测7例良性卵巢肿瘤、13例交界性卵巢肿瘤和64例上皮性卵巢癌的石蜡包埋标本及3例正常卵巢组织石蜡包埋标本中E-cadherin和Claudin-3的表达情况。2、利用荧光定量PCR (Real-time PCR)检测E-cadherin和Claudin-3的mRNA在人类正常卵巢组织、良性卵巢肿瘤及卵巢癌中的表达情况。3、采集患者完整的临床信息(包括卵巢癌患者的FIGO分期、病理类型、癌组织分化程度、腹膜转移的有无及手术方式、化疗次数、是否存活等)及对所得数据进行统计分析：样本率的比较用x2检验,组间比较采用t检验,E-cadherin和Claudin-3与病人生存期的关系用单因素分析及生存曲线。结果：1、E-cadherin和Claudin-3在正常卵巢组织和上皮性卵巢癌中的表达(免疫组化)：(1) E-cadherin在正常卵巢组织无表达；7例良性卵巢肿瘤中E-cadherin阳性染色6例,阳性率为85.7%；13例交界性卵巢肿瘤中E-cadherin阳性染色9例,阳性率为69.2%；64例卵巢癌中E-cadherin阳性染色35例,阳性率为54.7%。卵巢癌中E-cadherin的表达明显低于良性组和交界性组,差别具有统计学意义(P<0.05)。(2) claudin-3在正常卵巢组织无表达；7例良性卵巢肿瘤中claudin-3阳性染色2例,阳性率为28.6%；13例交界性卵巢肿瘤中claudin-3阳性染色6例,阳性率为46.2%；64例卵巢癌中claudin-3阳性染色40例,阳性率为62.5%。卵巢癌中claudin-3的表达明显高于良性组和交界性组,差别具有统计学意义(P<0.05)。2、E-cadherin和Claudin-3在正常卵巢、良性卵巢肿瘤及卵巢癌组织中mRNA的水平(RT-PCR):(1)E-cadherin在良性卵巢肿瘤、卵巢癌Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期和Ⅳ期患者的卵巢组织内mRNA的水平与正常卵巢组织的相比均表达下调,分别为正常组的0.95±0.05倍,0.92±0.07倍,0.74±0.01倍,0.53±0.02倍(P<0.05)和0.35±0.05倍(P<0.05)。说明E-cadherin mRNA的水平与卵巢癌期别有关,期别越晚,表达水平越低。(2) claudin-3在良性卵巢肿瘤、卵巢癌I、II、III期和IV期患者的卵巢组织内mRNA的水平与正常卵巢组织的相比均表达上调,分别为正常组的1.50±0.07倍,2.12±0.12倍(P<0.05),2.99±0.13倍(P<0.05),14.56±0.19倍(P<0.01)和19.22±0.22倍(P<0.01)。说明卵巢肿瘤组织内claudin-3mRNA水平明显高于正常卵巢组织。3、E-cadherin和Claudin-3的表达与上皮性卵巢癌临床病理参数的关系(1) E-cadherin在低分化卵巢癌中的阳性率为31.6%；在中分化卵巢癌中的阳性率为51.7%；在高分化卵巢癌中的阳性率为87.5%,E-cadherin随着分化程度的增高而表达增加,差别具有统计学意义(P<0.05)。claudin-3在低分化卵巢癌中的阳性率为87.5%；在中分化卵巢癌中的阳性率为58.6%；在高分化卵巢癌中的阳性率为47.4%, claudin-3随着分化程度的增高而表达降低,差别具有统计学意义(P<0.05)。(2) E-cadherin在浆液性卵巢癌中的阳性率为53.7%；在粘液性卵巢癌中的阳性率为58.8%；在子宫内膜样癌中的阳性率为50.0%,差别无统计学意义。claudin-3在浆液性卵巢癌中的阳性率为70.7%；在粘液性卵巢癌中的阳性率为52.9%；在子宫内膜样癌中的阳性率为33.3%,差别具有统计学意义(P<0.05)。(3) E-cadherin在卵巢上皮性癌Ⅰ-Ⅱ期中的阳性表达率90.0%,Ⅲ～Ⅳ期的阳性表达率则为23.5%,随着肿瘤的进展而表达减少,分期间的差异有统计学意义(P<0.01)。claudin-3在卵巢上皮性癌Ⅰ-Ⅱ期中的阳性表达率35.3%,Ⅲ-Ⅳ期的阳性表达率则为93.3%,随着肿瘤的侵袭、转移表达增加,分期间的差异有统计学意义(P<0.01)。总之,E-cadherin和claudin-3在卵巢上皮性癌组织中的表达与患者年龄、血浆CA125的高低均无关(P>0.05),而与卵巢上皮性癌的FIGO分期、癌组织分化程度、病理类型、有无腹膜转移均有关,差异有统计学意义(P<0.01)。4、E-cadherin和claudin-3的表达与患者生存期的关系经统计学分析发现,E-cadherin在卵巢癌Ⅰ+Ⅱ期中阳性表达的患者：5年的生存率是96.3%；而E-cadherin阴性表达的患者,1年生存率71.4%,3年生存率57.1%,5年生存率是42.9%,可见在早期卵巢癌中,两者对于患者的生存率有明显差异(P<0.05)。而E-cadherin在卵巢癌Ⅲ+Ⅳ期中阳性表达的患者：1年的生存率是75.0%；3年生存率是62.5%；5年的生存率是50.0%；阴性表达的患者：1年的生存率是81.8%；2年生存率是45.5%；3年的生存率是31.8%；5年的生存率是18.2%；两者之间差异显著,有统计学意义(P<0.05)claudin-3在早期卵巢癌中的表达对于患者的生存率无明显差异。但claudin-3在卵巢癌Ⅲ+Ⅳ期中阳性表达的患者：1年的生存率是78.6%；3年的生存率是42.9%；5年生存率28.6%；而claudin-3阴性表达的患者5年的生存率是50.0%；两者之间差异显著,有统计学意义(P<0.05)。结论：1、E-cadherin在上皮性卵巢癌中的表达与侵袭、转移密切相关,其在不同分期卵巢癌中的差异性表达也许可作为评判肿瘤恶性程度的指标,并可能成为转移性卵巢癌的治疗新靶点。2、Claudin-3与上皮性卵巢癌的侵袭和转移密切相关,其高表达也许可作为卵巢癌预后差的指标,可能对治疗及预测患者的预后具有指导作用。3、E-cadherin与claudin-3都与细胞的黏附、连接有关,两者在上皮性卵巢癌中的表达呈负相关,两种蛋白在卵巢癌的侵袭、转移中可能起协同作用。