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单基因遗传病种类多,发病率高,不仅对患者的健康造成了严重危害,而且也给家庭和社会带来了沉重的精神和经济负担。应用遗传病的基因诊断技术,可对不同发育时期的个体进行遗传病的基因诊断,既可诊断出生后的遗传病患者和症状前患者,又可诊断出生前的胎儿(产前诊断),甚至对着床前胚胎也可作出诊断(胚胎植入前遗传学诊断)。因此能对患者和症状前患者及时采取治疗措施和婚姻生育指导。而根据高危妊娠的产前基因诊断结果,选择性地终止异常胚胎妊娠,可防止遗传病患儿的出生。而通过胚胎植入前遗传学诊断(Preimplantation genetic diagnosis,PGD),在妇女怀孕前筛选正常胚胎移植,诞生健康的婴儿,可使妇女避免因反复选择性流产所引起的身心痛苦。对有生育遗传病患儿风险的夫妇而言,他们又多了一种可供选择的预防手段。为了全方位地防止单基因遗传病患儿的出生,本研究旨在丰富和完善我所现有的一般基因诊断及产前基因诊断技术,并以我室成熟的辅助生殖技术为依托,建立以软骨发育不全和β-地中海贫血为代表的单细胞PCR诊断单基因遗传病的技术平台,在此基础上,进一步将该技术推向临床,开展单基因病的PGD,并为众多单基因遗传病PGD的开展打下基础。不断丰富遗传病的预防手段,不仅从出生后诊断遗传病患者和症状前患者,而且从产前水平,甚至从植入前水平阻断遗传病的传递,减少遗传病患儿的出生。1.联合运用St14(DXS52)位点VNTR和FⅧ基因内的(CA)n重复多态性对甲型血友病进行基因诊断及产前基因诊断由于甲型血友病基因结构庞大,基因缺陷复杂多变,迄今已发现756种基因突变,且散布于基因内,缺乏突变热点,给直接基因诊断带来了一定的困难。因此,建立基于甲型血友病基因内外的(CA)n重复和VNTR多态性的连锁分析方法将成为该病的简捷、有效的基因诊断手段。我们采用上述2个串联重复多态位点进行连锁分析完成了对HA家系的间接基因诊断。分析表明单用上述2个多态位点中的1个对9个HA家系进行连锁分析,可诊断率均为66.7%,联合2个多态位点,则可诊断率提高到88.9%,完成了4个家系的产前基因诊断,并利用(CA)n多态分析监测到了St14位点分析时发生的重组事件,纠正了单用St14位点的VNTR多态