【摘 要】
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研究背景及目的:心力衰竭（heart failure,HF）是大部分心血管疾病的最终结局;其核心环节是心室重构,后者病理过程包括心肌细胞凋亡（cardiomyocyte apoptosis）、肥大（hypertrophy）及心脏纤维化（cardiac fibrosis,CF）。病理性失代偿心脏间质纤维化会增加心肌僵硬度,影响心脏的收缩和（或）舒张功能,导致心脏功能下降,在心室重构中起着非常重要的作
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（项目批准号：81673915）；
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研究背景及目的:心力衰竭（heart failure,HF）是大部分心血管疾病的最终结局;其核心环节是心室重构,后者病理过程包括心肌细胞凋亡（cardiomyocyte apoptosis）、肥大（hypertrophy）及心脏纤维化（cardiac fibrosis,CF）。病理性失代偿心脏间质纤维化会增加心肌僵硬度,影响心脏的收缩和（或）舒张功能,导致心脏功能下降,在心室重构中起着非常重要的作用。心脏成纤维细胞（cardiac fibroblasts,CFs）在心血管疾病中发生表型变化及变化后一系列功能改变是心肌纤维化的基础。自张仲景的《伤寒论》开始,传统中药附子就被广泛用于治疗心力衰竭类似症状。去甲猪毛菜碱（1-甲基-6,7-二羟基-1,2,3,4-四氢异喹啉,Salsolinol,Sal）是中国附子的主要水溶性强心生物碱,具有与β肾上腺素类似的强心作用。但Sal对于慢性心血管疾病防治作用报道非常少,对于其抗纤维化的研究至今未见。本研究目的:1、证明去甲猪毛菜碱在体内改善心功能、抑制心脏纤维化;2、证明去甲猪毛菜碱在体外能抑制心脏成纤维细胞激活,并探索其作用机制;3、探索去甲猪毛菜碱在体外对心脏肌成纤维细胞（myofibroblast,myo FBs）增殖、迁移、凋亡等功能的影响。研究方法:1.体内实验利用异丙肾上腺素（isoproterenol,ISO）诱导小鼠心衰模型。皮下注射ISO（30mg/kg/d）,并灌胃Sal（10mg/kg/d）,持续28d后行心脏超声检测心脏结构和功能变化;心脏取材时比较各组小鼠心重和体重比（Heart weight/Body weight,HW/BW）及心重和胫骨长度比（Heart weight/Tibia length,HW/TL）,q PCR检测比较小鼠ANP/BNP/β-MHC等胚胎基因的转录水平;Masson染色及天狼星红染色比较小鼠心肌组织纤维化程度,并利用q PCR检测胶原Ⅰ、Ⅲ（ColⅠ、Ⅲ）的m RNA水平。2.体外实验表型方面,培养乳鼠心肌成纤维细胞,饥饿后采用TGF-β1诱导心脏成纤维细胞活化模型,q PCR检测去甲猪毛菜碱对CFs激活后相关基因标志物如ACTA2m RNA的调节作用,蛋白免疫印迹法（Western blot,WB）检测成纤维细胞表型转化后相关蛋白如α-平滑肌肌动蛋白（alpha smooth muscle actin,α-SMA）表达水平,多途径证明Sal可以抑制CFs的表型转化。最后针对Sal抑制CFs激活的通路进行研究,检测SMAD经典通路相关蛋白表达水平,加用β-AR、PI3K抑制剂后检测ACTA2 m RNA及α-SMA蛋白表达。功能方面,利用CCK8、划痕实验、流式细胞术等检测Sal对肌成纤维细胞增殖、迁移及凋亡的影响。结果:1.体内实验结果Sal能改善ISO诱导的小鼠射血分数升高、胚胎基因（ANP、BNP和β-MHC）表达的增加,及胶原蛋白沉积。2.体外实验结果Sal能抑制TGF-β诱导的心脏成纤维细胞激活,其作用机制与SMAD经典通路相关,与β-AR、PI3K等信号通路无关。Sal不能抑制肌成纤维细胞迁移,但能抑制肌成纤维细胞增殖,其机制与抑制细胞分裂周期有关。结论:（1）Sal在体内能抑制心脏间质纤维化,改善心功能;（2）Sal抑制心脏成纤维细胞激活抗心肌纤维化可能是通过调节TGF-β/Smad信号通路实现的;Sal抑制心脏肌成纤维细胞增殖的机制可能与抑制细胞分裂周期有关。
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【目的】本研究通过观察中药联合动脉灌注化疗（Transcatheter arterial infusion,TAI）治疗不可切除非小细胞肺癌（Non-small cell lung cancer,NSCLC）患者的临床病例资料,评价中药联合TAI治疗不可切除NSCLC的临床价值,探讨影响肺癌预后的相关因素,为临床推广应用中药联合TAI治疗肺癌提供参考依据,并为进一步研究奠定基础。【方法】采用回顾性
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目的:建立子宫内膜异位症小鼠模型,初步明确不同浓度的木犀草素对小鼠子宫内膜异位症模型异位病灶纤维化的干预作用,并进一步探讨其可能的作用机制。方法:1.选择健康雌性未孕C57BL/6小鼠作为研究对象,采用腹壁手术固定内膜组织的方法建立子宫内膜异位症模型,分别于造模后第5、7、14、21天随机处死一组小鼠,分离异位病灶。进行异位病灶的观察,行HE染色和Masson染色、Sirius Red染色判断异位