【摘 要】
:
研究背景和目的 根据2020年最新全球癌症调查报告,结直肠癌位居恶性肿瘤发病率第3位,死亡率第2位,已经严重威胁到我们人类的生命健康。本课题组长期专注于结直肠癌分子机制的研究,我们既往报道lncRNA CASC11通过结合HNRNPK蛋白增加β-catenin入核调控WNT信号通路促进结直肠癌细胞增殖和迁移。然而,CASC11在肿瘤中还具有其他丰富多样的分子机制;CASC11能否作为竞争性内源性R
【基金项目】
:
国家自然科学基金(No.81874074,No.81672429,No.82072705);
论文部分内容阅读
研究背景和目的 根据2020年最新全球癌症调查报告,结直肠癌位居恶性肿瘤发病率第3位,死亡率第2位,已经严重威胁到我们人类的生命健康。本课题组长期专注于结直肠癌分子机制的研究,我们既往报道lncRNA CASC11通过结合HNRNPK蛋白增加β-catenin入核调控WNT信号通路促进结直肠癌细胞增殖和迁移。然而,CASC11在肿瘤中还具有其他丰富多样的分子机制;CASC11能否作为竞争性内源性RNA(ceRNA)在结直肠癌中发挥作用尚不清楚。本课题重点阐明CASC11作为ceRNA靶向miR-646和miR-381-3p调控RAB11FIP2在结直肠癌中发挥作用的分子机制。研究方法 运用生物信息学数据库预测与CASC11结合的miRNAs,利用双荧光素酶报告基因实验锁定miR-646和miR-381-3p,再进行荧光原位杂交(FISH)检测CASC11与miR-646和miR-381-3p在结直肠癌细胞内共定位的情况。应用CCK8增殖实验、平板克隆形成实验、流式细胞术、划痕愈伤、Transwell迁移实验、裸鼠皮下瘤模型、脾被膜注射肝转移瘤模型等一系列体内外功能实验研究miR-646和miR-381-3p回复CASC11介导的结直肠癌细胞增殖和迁移表型。再运用TargetScan数据库预测miR-646和miR-381-3p的共同靶基因;利用荧光定量PCR(qRT-PCR)、Western blotting及双荧光素酶报告基因实验确定二者的共同靶基因RAB11FIP2。后续使用qRT-PCR、Western blotting及免疫组织化学(IHC)检测CASC11与RAB11FIP2在结直肠癌组织和细胞中表达的相关性及相互调控关系,再利用体外功能回复实验检测siRAB11FIP2对CASC11过表达介导的结直肠癌细胞增殖和迁移表型的影响。最后,运用基因转录组测序联合KEGG通路富集分析筛选相关信号通路,使用Western blotting、免疫荧光(IF)及免疫组化检测CASC11通过miR-646和miR-381-3p/RAB11FIP2信号轴调控PI3K/AKT 通路。研究结果 在结直肠癌细胞中CASC11靶向结合miR-646和miR-381-3p,且CASC11与miR-646和miR-381-3p在结直肠癌细胞质内共定位;miR-646和miR-381-3p抑制剂可以逆转CASC11敲降对结直肠癌细胞体内外增殖和迁移的抑制作用,miR-646和miR-381-3p模拟物可以逆转CASC11过表达对结直肠癌细胞体外增殖和迁移的促进作用。miR-646和miR-381-3p均与RAB11FIP2-3’ UTR区结合,并且抑制RAB11FIP2蛋白翻译。CASC11和RAB11FIP2在结直肠癌组织和细胞中高表达,CASC11高表达与肿瘤大小、淋巴管-血管侵犯、淋巴结转移和T分期呈正相关;RAB11FIP2高表达与肿瘤大小和T分期呈正相关,且两者在结直肠癌组织中的表达具有正相关性;miR-646和miR-381-3p在结直肠癌组织和细胞中呈低表达。CASC11与RAB11FIP2在结直肠癌细胞中互为正向调控;下调RAB11FIP2可逆转CASC11过表达介导的结直肠癌细胞体外增殖和迁移表型。CASC11 通过 miR-646 和 miR-381-3p/RAB11FIP2 轴调控 PI3K/AKT 信号通路在结直肠癌中发挥促癌作用。结论 CASC11海绵吸附miR-646和miR-381-3p上调二者共同靶基因RAB11FIP2调控PI3K/AKT信号通路促进结直肠癌细胞增殖和迁移。本研究进一步丰富了CASC11在结直肠癌发生发展中的分子机制,也为结直肠癌的治疗提供新思路。
其他文献
<正>一、绪论(一)适应智能财务发展,推动企业数字化转型的需要近年来,国家所倡导的新经济发展使社会和工作环境发生了根本性变化,财务管理的自动化、智能化、平台化使得财务与科技的系统作用逐渐加强。国家财政部和国资委对中央企业财务信息化建设提出了更高的要求,特别强调要建设功能完善的财务信息系统,财务合并报告系统是内外部监管重点。目前,集团合并报告仍处于手工编制阶段,存在编报质量不高、
研究背景 脑出血是常见的脑卒中类型之一,约占全部脑卒中的15%~20%,年发病率约24.6/10万,并且脑出血还是全部卒中类型中预后最差的,发病后1个月病死率为40.4%,1年病死率为54.7%,存活患者中致残率高达75%,且目前缺乏有效治疗手段。在过去10年间,脑出血的发病人数不断增加,已经成为全球最严重的公共卫生问题之一。而脑出血中血肿早期扩张与脑出血预后不良高度相关,并且有可能是进行早期临床
背景和目的:胶质瘤是最常见的中枢神经系统肿瘤,具有侵袭性强、预后差的特点。纳米药物作为新型治疗手段,有望改善胶质瘤患者的预后。由于血脑屏障(BBB)和胶质瘤微环境的影响,限制了纳米药物在体内的转运和起效。基于此,本课题设计一种新型环境自适应型纳米药物,并探究这种纳米药物克服体内复杂内环境的能力及对胶质瘤的影响,明确环境自适应型纳米药物治疗胶质瘤的可能性。方法:通过核磁共振氢谱、紫外分光光度法、蛋白
研究背景世界卫生组织、欧洲联盟和其他组织的医学指南和公共倡议建议减少盐的摄入量。但是,盐的消耗量仍然很高。盐摄入量增多导致肾脏损害,甚至影响药物的正常作用。病理状态下,处于较高能量代谢水平的近端肾小管上皮细胞更容易受到能量代谢紊乱的影响。高盐是否影响糖尿病肾脏病近端肾小管脂肪酸代谢以及钠葡萄糖共转运蛋白2抑制剂(sodium-glucose cotransporter 2 inhibitor,SG
随着年龄的增长,机体的免疫系统功能下降,老年人通常比年轻人更容易受到感染。目前全球人口老龄化形势十分严峻,截止2020年,全世界60岁或以上的老龄人口已经达到7.27亿,而且到了 2050年这一数字预计将是现在的两倍多,衰老研究已经成为当前的重要领域。机体衰老通常伴随着全身系统功能的一系列变化,免疫衰老就是其中一个重要特征,主要表现为:老年人适应性免疫力下降而引起的感染风险和肿瘤发生率上升,以及疫
目的1.探讨基于术前CT单任务放射组学标签的模型分别预测非小细胞肺癌(NSCLC)间变性淋巴瘤激酶(ALK)突变状态、Ki-67表达水平的价值。2.开发并验证基于术前CT多任务放射组学标签的模型联合预测NSCLC ALK突变状态、Ki-67表达水平。3.开发并验证基于术前CT深度学习标签的诺模图预测可手术切除的NSCLC的总生存。方法1.训练组370例,验证组135例。利用SERA提取CT图像放射
研究背景和目的自体脂肪组织因为其来源广泛、获取方便等优点被认为是最理想的软组织填充材料。因此自体脂肪移植术已成为了当前整形外科领域应对大体积软组织缺损及组织填充的主要治疗手段之一。然而,移植后脂肪的存活率尚偏低,现有的理论仍然无法完整的阐明游离脂肪移植后在机体内的保留机制,其中关于细胞外基质(ECM)的作用更是甚少被提及。目前认为,ECM能够在机体内对细胞起到物理支持的作用,并且能够通过传递信号分
研究背景和目的胃癌来源于胃粘膜上皮,是全球最常见的恶性肿瘤之一。根据组织病理学分类,胃癌分为腺癌、腺鳞癌、鳞癌、类癌等,腺癌约占胃癌的95%。尽管已有放射疗法、化学疗法、外科手术和其他新方法来治疗胃癌,但其五年生存率仍然很低,许多研究聚焦于胃癌的发病机制。在肺癌和结直肠癌中,ENKUR已经被报导为是一个抑癌基因,可以抑制肿瘤细胞增殖、迁移和侵袭,但在胃癌中仍未被报导,因此我们探讨了 ENKUR在胃
背景和目的中性粒细胞是数量最多的参与固有免疫应答的细胞,占外周血白细胞数量的50%-70%,也是机体抵御入侵病原体的首道防线,在机体免疫应答中发挥着重要的作用。因此,协调中性粒细胞的发育、稳态和生理活动的机制对于建立强大的机体免疫屏障非常重要。骨细胞在骨骼中是最丰富的(占90-95%),寿命最长,却是骨骼细胞中目前研究最少的细胞类型。骨细胞通过机械信号转导和分泌骨硬化素和核因子κB受体活化因子配体
脓毒症是宿主对感染的反应失调而导致的危及生命的器官功能障碍。肝脏作为机体重要的代谢和免疫防御器官,在脓毒症发病过程中发挥重要的宿主防卫作用。肝脏血运丰富且解剖位置独特,其作为肠道内毒素和过度炎症反应攻击的靶点,是脓毒症最易受累的器官之一。据统计,有高达46%的脓毒症患者合并肝功能损伤,而肝功能障碍作为一个独立危险因素严重影响脓毒症患者的预后。肝脏固有巨噬细胞-枯否细胞是肝脏中吞噬致病微生物、清除内