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脑卒中具有高发病、高致死、高致残的特点,给患者带来极大痛苦,给社会带来巨大负担。缺血性脑卒中占脑卒中患者的80%-85%,研发治疗缺血性脑卒中的药物和剂型有着重大意义。灯盏花素是从灯盏花中分离的黄酮类有效成分,是临床上治疗缺血性脑卒中的常用药,灯盏乙素（又名野黄芩苷）是灯盏花素的主要药理活性成分,然而水溶性差、生物利用度低和注射给药依从性差等问题使其应用存在局限性。野黄芩苷镁是课题组前期研制的野黄芩苷的镁盐,已获得国家发明专利授权。其在水中的溶解度显著高于野黄芩苷,而且注射给药后,在抗大鼠脑缺血再灌注损伤方面,野黄芩苷镁盐的药效明显优于野黄芩苷。因此,野黄芩苷镁替代野黄芩苷用于缺血性脑卒中疾病的治疗具有较大的潜力。常用的口服给药容易受到胃肠道内稳定性和肝脏首过效应的影响,导致生物利用度降低的问题;注射给药需专业的医护人员操作而且患者依从性差。因此本论文将对适合野黄芩苷镁的给药方式和合理剂型进行研究,旨在为野黄芩镁的临床应用提供基础。目的:制备野黄芩苷镁鼻用温敏原位凝胶,旨在提高野黄芩苷镁的生物利用度,使野黄芩苷镁到达脑内的浓度增加,为野黄芩苷镁用于治疗缺血性脑卒中的剂型开发提供实验数据,为其进行深入的治疗缺血性脑卒中的药效学研究提供基础。方法:1采用HPLC法测定野黄芩苷镁在纯水、p H5.5和6.8磷酸缓冲盐溶液中的平衡溶解度;确定适当的油水分配比例后,应用HPLC法测定野黄芩苷镁在不同水相和油相中的浓度,计算油水分配系数。2以泊洛沙姆407（P407）和泊洛沙姆188（P188）为凝胶基质,采用冷溶法制备野黄芩苷镁鼻用温敏原位凝胶（Scu-Mg-G）,以胶凝温度为评价指标,单因素考察确定P407和P188的浓度范围。采用星点设计-效应面优化法设计,以胶凝温度为响应值,选取P407和P188的浓度二个因素,P407和P188的浓度优化处方。以羟丙基-β-环糊精（HP-β-CD）为促进吸收剂,按照最优处方,分别制备含有吸收促进剂的Scu-Mg-G（Scu-Mg-GT）和不含有吸收促进剂的Scu-Mg-G。通过考察其外观、p H、胶凝温度、黏度、膨胀系数、初步稳定性等方面对制备的Scu-Mg-G进行体外质量评价;HPLC法测定凝胶中野黄芩苷镁的含量;采用振荡透析释放法和无膜溶出法考察其体外释放行为。3通过灌胃（ig）、尾静脉注射（iv）的给药方式分别给予SD大鼠野黄芩苷镁溶液剂（Scu-Mg-S）,通过滴鼻的给药方式分别给予SD大鼠Scu-Mg-G、Scu-Mg-GT和Scu-Mg-S,给药后在不同时间点采血,收集血浆。应用UPLC-MS/MS法测定5组大鼠血浆中野黄芩苷镁的浓度,绘制血药浓度-时间曲线。应用DAS3.0软件计算主要药动学参数。4通过ig、iv的给药方式给予SD大鼠Scu-Mg-S,通过滴鼻的给药方式给予SD大鼠Scu-Mg-G、Scu-Mg-GT和Scu-Mg-S,给药后在不同时间点对大鼠予以麻醉,取脑组织。应用UPLC-MS/MS法测定5组大鼠脑组织中野黄芩苷镁的浓度,绘制脑内浓度-时间曲线。应用DAS 3.0软件计算主要药动学参数。结果:1野黄芩苷镁在3种不同介质中的溶解度大小顺序为:水＞p H6.8＞p H5.5,且在水中的溶解度为145.35 mg/m L;油水分配系数log Papp分别为-3.34,-3.28,-3.23。2通过星点设计-效应面法筛选的Scu-Mg-G最优处方为P407占19%、P188占0.5%,T为30℃。HP-β-CD的用量为0.5%,T为31℃。制备的两种Scu-Mg-G的外观和p H值均符合鼻用制剂的相关规定;Scu-Mg-G的黏度从30℃开始急剧变大,Scu-Mg-GT的黏度从31℃开始急剧变大,表明Scu-Mg-G在室温下可以保持液体状态给药,进入鼻腔后在鼻腔的生理环境下形成凝胶状态;形成凝胶后两种原位凝胶均无明显的体积膨胀,对患者的依从性影响较小;且初步稳定性良好。振荡透析释放法结果表明,Scu-Mg-G释放曲线更符合Higuchi模型;无膜溶出法结果表明Scu-Mg-G的释放主要以溶蚀为主。3相同剂量下,ig、iv、Scu-Mg-G、Scu-Mg-GT和Scu-Mg-S-nar血浆中的药时曲线下面积AUC（0-24h）分别为（39.278±16.092）g/m L*h,（380.783±154.470）g/m L*h,（80.529±31.297）g/m L*h,（114.597±38.34）g/m L*h和（107.343±47.596）g/m L*h;Cmax（g/m L）分别为（4.190±1.818）g/m L,（610.258±235.985）g/m L,（57.178±21.423）g/m L,（62.799±32.150）g/m L和（51.138±47.846）g/m L。Scu-Mg-G和Scu-Mg-GT的AUC（0-24h）分别是ig的2.1倍和2.9倍,P＜0.01;MRT（0-24h）分别是iv的3.7倍和5.3倍,P＜0.01。野黄芩苷镁经口服给药的绝对生物利用度为10.32%,Scu-Mg-G、Scu-Mg-GT和Scu-Mg-S-nar的绝对生物利用度为21.15%,30.10%和28.19%,表明与口服途径相比,将野黄芩苷镁制成温敏原位凝胶,通过鼻腔给药的方式,可以提高其生物利用度。4与通过iv（1.6倍鼻腔给药剂量）和ig（30倍鼻腔给药剂量）给予Scu-Mg-S的给药方式相比,将Scu-Mg-G经鼻腔给药后,野黄芩苷镁在脑内的递送量分别增加480.39%～1220.75%,104.51%～365.39%。相同剂量下,ig、iv、Scu-Mg-G、Scu-Mg-GT和Scu-Mg-S-nar组大鼠脑组织中的AUC（0-24h）分别为1.215,8.565,77.671,176.749,168.062ng/mg*h;Cmax分别为0.286,8.801,26.314,40.309,30.088 ng/mg。Scu-Mg-G的BTI鼻/iv为43.86,Scu-Mg-GT的BTI鼻/iv为70.09,Scu-Mg-S-nar的BTI鼻/iv为71.17,BTIig/iv为0.78。表明通过鼻腔给药后,部分野黄芩苷镁能绕过血脑屏障,提高在脑内的浓度,具有脑靶向性。结论:1制备了Scu-Mg-G制剂,T为30℃,在室温下为液体,在鼻腔环境可形成凝胶。其释放主要以溶蚀为主,扩散为辅。2鼻腔给药后,药动学研究结果表明,Scu-Mg-G通过鼻腔给药的方式提高了野黄芩苷镁的生物利用度;脑组织中,在同等剂量下,野黄芩苷镁通过鼻腔给药的AUC（0-24h）和Cmax显著高于ig和iv给药,BTI值表明将野黄芩苷镁通过鼻腔给药具有明显的脑靶向性,且将野黄芩苷镁制成原位凝胶具有一定的缓释作用。