脂多糖对人蜕膜细胞中PR及TNF-α表达影响的研究

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目的:通过采用脂多糖作用体外培养人蜕膜细胞,研究脂多糖对人蜕膜细胞中孕激素受体(PR)和TNF-a的表达改变,探讨细菌感染导致自然流产的发病机理。方法:收集正常早孕人工流产病例10例,分离人原代蜕膜细胞,用免疫细胞化学法检测胎盘泌乳素鉴定蜕膜基质细胞。取培养传代第4、5代细胞加入脂多糖(其终浓度分别为25ng/ml 50ng/ml 100ng/ml 200ng/ml)处理24h为实验组一至四组,仅加入细胞培养液为对照组。采用激光共聚焦-细胞免疫荧光技术检测各组蜕膜细胞中PR及TNF-α的Cy3荧光表达,用Image J图像分析软件分析PR及TNF-α的荧光强度,采用SPSS17.0统计软件包进行数据分析,用随机区组设计方差分析比较不同浓度LPS对蜕膜细胞中PR及TNF-α表达的变化。并用线性相关分析法对各组蜕膜细胞的PR及TNF-α的表达进行相关性分析。结果:1.人原代蜕膜细胞体外培养分离成功,经免疫细胞化学检测蜕膜细胞胎盘泌乳素阳性率95%。2.实验组蜕膜细胞中PR平均荧光强度较对照组明显降低,且随着脂多糖浓度逐渐增加,PR的平均荧光强度降逐渐降低,差异显著性,P<0.01,有统计学意义。3.实验组蜕膜细胞中TNF-α平均荧光强度较对照组明显增强,且随着脂多糖浓度增大,蜕膜细胞内TNF-α荧光强度逐渐增强,差异有显著性,P<0.01,有统计学意义。4.蜕膜细胞中,PR与TNF-α表达呈负相关(r=-0.841,P<0.01)结论:1.脂多糖使体外培养的人蜕膜细胞中PR表达减少,脂多糖浓度越高,PR越低。2.脂多糖促进人蜕膜细胞的TNF-α的表达增加,脂多糖浓度越高,TNF-a表达越高。3.体外培养人蜕膜细胞中PR与TNF-α表达呈负相关。
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