石油降解微生物的筛选及其降解特性的研究

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近年来,水体环境石油污染问题日益严重,寻找高效的石油降解菌株成为水体石油污染生物修复的一个重要研究方向。本文分离筛选到几株对石油具有高效降解作用的菌株,针对其降解特性进行了降解条件的优化研究,开展了菌株的组合降解试验。同时在应用研究方面采用人工海水进行了实验室小试规模的动态及静态的石油污染生物修复模拟。具体的研究结果如下所示:(1)分离筛选到3株降解石油效果较好的菌株,分别为J7,对3株菌分别进行了生理生化及16SrDNA同源性比对分析,得到结果为SY2枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、H2铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、J7恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)。(2)研究了不同盐度、pH、温度、原油浓度、处理时间、过氧化氢深度氧化、辅助碳源、辅助氮源8个因素对上述3株菌石油烃降解效果的影响。结果表明:最优条件下,SY2石油烃降解率最高可达67.78%,J7达72.02%,H2达83.64%。在此基础上采用接力式混菌降解实验,发现H2-J7, SY2-J7两种模式的混菌效果最好,降解高达86%左右。(3)对菌株降解后残油进行气相色谱分析,结果表明,原油经过三株菌的生物降解后,其石油烃的种类及含量均有很大程度的减少,特别是H2菌株处理后,烃类由原来30种左右减少至5-6种,且含量也仅为20%左右。(4)利用人工模拟原油污染海水进行开放环境投菌实验,恒温摇床动态模拟直接投菌生物修复试验得到:添加N,P营养实验组SY2, H2, J7菌株处理后降解率分别达到68.71%,63.11%,35.67%,与不添加N、P营养的对照组相比(降解率分别为33.07%、28.45%、12.9%),降解效果获得了很大的提高。通过不同投菌量试验,得到在106cfu/mL的菌体浓度条件下,各株菌均能获得较好的降解效果。(5)采用恒温培养箱静态模拟人工污染海水生物修复,分别采用直接投菌、稻草粉固定化菌体投菌、无纺布固定化菌体投菌、纺粘毛固定化菌体投菌四种投菌模式,结果显示:固定化投菌效果明显优于直接投菌的方式,3株菌的最佳固定化材料有所差异。SY2和J7最佳固定化材料为稻草粉,降解率分别为70.62%和55.3%,H2最佳固定化材料为无纺布,降解率达到77.23%。综上所述,本研究为基于微生物的石油水体污染生物修复提供了应用基础。
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