【摘 要】
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目的:研究哮喘疾病CD4+T淋巴细胞中T细胞活化衔接子（linker for activation of T cells,LAT）、磷脂酶C-γ1（phospholipase C-γ1,PLC-γ1）的表达以及PLC-γ1的磷酸化活化状态,探讨其在CD4+T细胞分化中作用,以及在哮喘发病中的作用机制。方法:（1）卵清蛋白（ovalbumin,OVA）致敏并激发建立哮喘小鼠动物模型,通过气道激发实验
【基金项目】
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哮喘中T细胞活化衔接子对调节性T细胞调控研究（国家自然科学基金）；
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目的:研究哮喘疾病CD4+T淋巴细胞中T细胞活化衔接子（linker for activation of T cells,LAT）、磷脂酶C-γ1（phospholipase C-γ1,PLC-γ1）的表达以及PLC-γ1的磷酸化活化状态,探讨其在CD4+T细胞分化中作用,以及在哮喘发病中的作用机制。方法:（1）卵清蛋白（ovalbumin,OVA）致敏并激发建立哮喘小鼠动物模型,通过气道激发实验、肺组织病理、血清及BALF细胞因子检测验证哮喘小鼠动物模型成功建立。（2）免疫磁珠分离提取肺组织CD4+T淋巴细胞,用流式细胞仪检测Th1/Th2/Th17/Treg细胞比例,real-time PCR和Western blot检测相关细胞因子和LAT、PLC-γ1以及磷酸化PLC-γ1（p-PLC-γ1）等在CD4+T淋巴细胞中的表达。（3）建立体外诱导CD4+T细胞向Th2细胞分化模型。检测PLC-γ1和p-PLC-γ1改变。（4）构建LAT和PLC-γ1过表达质粒和特异性Si RNA转染CD4+T淋巴细胞,干预LAT和PLC-γ1表达,进一步检测Th1/Th2/Th17/Treg细胞比例的改变及相关因子的表达。结果:（1）成功建立哮喘小鼠模型。与对照组相比,哮喘组小鼠肺CD4+T淋巴细胞中Th2细胞比例增高,Th1和Treg细胞比例降低,LAT m RNA和蛋白表达降低。PLC-γ1 m RNA和蛋白表达与对照组无明显差异,而p-PLC-γ1较对照组明显降低,差异有统计学意义（P<0.05）。（2）体外成功诱导Th2细胞分化,Th2分化细胞中p-PLC-γ1明显降低,且IL-4诱导的分化过程与HDAC1引起的组蛋白乙酰化和Ras/MAPK信号通路相关;（3）Si RNA分别干扰LAT和PLC-γ后可见Th2细胞相关基因的表达增加,Th1相关基因的表达略有降低。（4）LAT和PLC-γ1过表达质粒分别转染CD4+T淋巴细胞后,与对照组相比,Th2细胞比例略有降低,Treg细胞转录因子foxp3增加明显。结论:LAT-PLC-γ1信号通路参与调节CD4+T淋巴细胞分化,LAT-PLC-γ1相互作用的减弱有助于CD4+T细胞向Th2细胞分化。这一机制也参与了IL-4诱导的Th2细胞分化,并在一定程度上参与支气管哮喘疾病的发生。
其他文献
目的:全身麻醉药导致意识消失的机制至今尚不清楚。中央内侧丘脑（CMT）参与组成非特异性觉醒系统,且有报道证实接受来自蓝斑核（LC）去甲肾上腺素（NE）能纤维投射,但CMT-NE能通路是否参与调节全麻苏醒,尚未见报道。本研究拟探讨CMT-NE能传输通路是否参与调控丙泊酚麻醉诱导或苏醒过程。方法:首先,将成功建立CMT微注射大鼠模型,随机分为两组:人工脑脊液组（ACSF）和去甲肾上腺素（NE）组,每组
目的:验证面神经支配的肌肉和肢体神经支配的肌肉对罗库溴铵的敏感性是否存在差异,观察面神经受损后肌肉对罗库溴铵的药效学改变。探讨不同肌肉对罗库溴铵的敏感性差异是否与神经肌接头大小、肌纤维大小以及烟碱型乙酰胆碱受体（Nicotinic Acetylcholine Receptor,nAChR）亚基的定量、定位和定性改变有关。同时探索不同肌肉nAChR的表达差异和改变是否和agrin/Lrp4/MuSK
目的:头皮缺损在临床上较为常见,各种创伤、头皮或颅骨的良恶性肿瘤切除、车祸或者电击伤后、慢性炎症感染致头皮坏死均可造成局部缺损。头皮作为人体的一个有毛发生长的重要暴露部位,决定了术者对头皮缺损的修复既要考虑覆盖局部创面,也要兼顾患者美学修复需求。尽管国内外有众多文献报告头皮缺损的修复方法,但都各有利弊。如何采用更好的治疗方法修复头皮缺损,改善患者术后的外观,提升其对外貌恢复的期望值是对整形外科医师
背景和目的:骨关节炎（OA）是最常见的退行性关节疾病,其主要表现为:软骨基质破坏、软骨下骨重塑和滑膜炎症。目前临床上并没有有效的治疗方法,直到最后阶段由于疾病需要而进行关节置换手术。骨关节炎的发生主要归因于关节软骨合成代谢和分解代谢的失衡,而促炎症因子（如IL-1β、TNF-α和IL-6）在这个过程中扮演至关重要的角色。其中,IL-1β主要参与软骨基质降解,而TNF-α则主要介导OA中炎症级联反应
研究背景:近年来,麻醉药物对婴幼儿神经系统的毒性作用得到了广泛的社会关注。妊娠末3个月至出生后2-3年,是人类神经系统的快速发育期,在此期间未成熟神经系统对毒性因子异常敏感。动物研究已证实多种麻醉药物在此期间可以对发育期大脑产生毒性作用。七氟烷作为常用的吸入性全麻药物之一,由于其特有的理化特性,被广泛应用于儿科麻醉的诱导及维持。目前有研究证实接受反复七氟烷麻醉的动物幼崽可以在其成年后表现出学习能力
目的从解剖和组织学角度研究大鼠颅外段面神经、舌下神经,为面-舌下神经吻合（FHA）大鼠实验模型的建立提供参考依据;对FHA端端吻合（ETE）和端侧吻合（ETS）后神经形态和功能的恢复进行动态评估,并探索ETS再生纤维的来源;通过建立四种临床常用FHA术式的大鼠模型,系统研究供体神经不同处理方式对受体面神经再生及供体神经肌肉系统的影响。材料和方法（1）显微镜下解剖大鼠颅外段面神经、舌下神经,测量相关
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骨缺损的治疗一直是骨科的难题和研究热点。异体骨移植治疗骨缺损是一种常用的方法。然而,同自体骨相比,理化处理的异体骨有一些缺点:异体骨没有足够的形成新生骨组织的干细胞;异体骨没有促进成骨的生长因子;异体骨没有可以提供骨营养成分必要的血管。因此,如若可以提供同自体骨一样包含干细胞、生长因子和新生血管的生成,即可促进异体骨移植治疗骨缺损的修复效果。本论文根据骨修复的需求,我们希望通过靶向Notch信号通
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