【摘 要】
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创伤弧菌（Vibrio vulnificus）是一种在咸水环境及贝类等海产品中广泛存在的致病菌,严重威胁着食品安全和公众健康,被美国疾病预防控制中心列为3大致病性弧菌之一。我国迄今尚无检测食品中创伤弧菌的标准方法,缺乏对食品中创伤弧菌污染状况的了解,对该菌的特性认识还不深入。本研究优化了食品中创伤弧菌的检测方法,调查了食品中创伤弧菌污染状况,并利用全基因组测序技术探究了食源性创伤弧菌的耐药机制。主
【基金项目】
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国家重点研发计划“跨境食品潜在、新发病原生物筛查监控技术及溯源建设平台”（项目编号:2016YFD0401102）；
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创伤弧菌（Vibrio vulnificus）是一种在咸水环境及贝类等海产品中广泛存在的致病菌,严重威胁着食品安全和公众健康,被美国疾病预防控制中心列为3大致病性弧菌之一。我国迄今尚无检测食品中创伤弧菌的标准方法,缺乏对食品中创伤弧菌污染状况的了解,对该菌的特性认识还不深入。本研究优化了食品中创伤弧菌的检测方法,调查了食品中创伤弧菌污染状况,并利用全基因组测序技术探究了食源性创伤弧菌的耐药机制。主要研究结果如下:（1）建立了一种适合我国食品中创伤弧菌检测的方法。具体检测流程为:样品→蛋白胨-氯化钠-纤维二糖-多粘菌素E（PNCC）肉汤增菌→PCR初筛→纤维二糖-多粘菌素E（CC）平板和改良纤维二糖-多粘菌素B-多粘菌素E（m CPC）平板分离→PCR鉴定。所建方法对水产品中创伤弧菌检出限达到×10~1CFU/25g。通过Biolog分析,阐明创伤弧菌在N-乙酰基-D-半乳糖胺、β-甲基-D-半乳糖苷和α-酮戊二酸中的生长状况明显优于副溶血性弧菌和溶藻弧菌,对奈夫西林（Nafcillin）、亚碲酸钾、多聚赖氨酸和5-硝基-2-糠醛-缩氨基脲耐受性也显著优于后2种弧菌。（2）利用建立的方法检测了北京市售水产品中创伤弧菌的污染状况。结果表明:北京市售水产品中创伤弧菌平均污染率为14.10%,其中虾类污染率高达34.78%;其次是贝类,污染率为17.11%。81株创伤弧菌分离株对头孢唑林耐药率达100%,对氨苄西林、阿莫西林/克拉维酸、头孢噻肟、头孢他啶、庆大霉素和复方新诺明的耐药率为1.23%。所有创伤弧菌分离株均为vcg C型（100%）,16S r RNA分型结果显示76株为16S r RNA B型（93.83%）,5株为16S r RNA AB型（6.17%）,无生物2型血清E型。（3）基于全基因组测序方法探究了创伤弧菌的耐药机制。结果表明:供试创伤弧菌基因组中没有与耐药表型对应的耐药基因,与耐药相关的外膜蛋白Omp U编码基因碱基发生了大量变异但均为沉默突变。创伤弧菌耐药性的获得与耐药基因及外膜蛋白编码基因omp U突变无关。
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